硫化氢通过促进铁可用性和植物激素水平来减轻铁缺乏症gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba幼苗gydF4y2Ba

背景gydF4y2Ba

硫化氢(HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba参与调节植物的生理过程。我们研究了HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba改善了大豆的铁（Fe）缺乏症（gydF4y2Ba大豆gydF4y2Bal .)幼苗。多学科研究方法包括生理、生化、分子和转录组方法gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS在调节大豆幼苗中的FE供货方面的作用。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba

结果表明，HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS完全防止叶片间萎缩，在Fe缺陷条件下导致大豆幼苗生物量增加。此外，H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS通过调节铁螯合物还原酶（FCR）活性和硫代谢相关基因表达水平来降低根染色的妊娠Fe，增加叶片和根部的Fe含量，从而促进大豆幼苗中的光合作用。另外，hgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba通过调节在Fe缺陷溶液中生长的大豆幼苗中的植物激素相关基因表达丰度来改变植物激素浓度。此外，有机酸生物合成和相关基因表达在调节H时也发挥了至关重要的作用gydF4y2Ba_2gydF4y2Bas介导的大豆幼苗缺铁的缓解。gydF4y2Ba

结论gydF4y2Ba

我们的结果表明，H的Fe缺乏减轻了gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba通过增强铁的获取和同化，从而调节植物体内的激素和有机酸的合成。gydF4y2Ba

铁是植物生长发育和人类健康生活所必需的微量营养素。铁作为一种普遍的辅助因子，在光合作用、呼吸作用、激素生物合成、形态发生、细胞酶反应和植物生长发育过程中发挥着重要作用[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba那gydF4y2Ba2gydF4y2Ba］．虽然土壤中Fe含量较高，但由于氧化态Fe(III)在碱性土壤中的复合溶解度较低，作物往往难以吸收利用[gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba］．缺铁还会导致叶片脉间褪绿和叶绿素生物合成障碍，进而影响植物的光合作用和生长发育[gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba］．因此，Fe的摄取和可用性与植物生长和作物生产率密切相关。gydF4y2Ba

Fe吸收，运输和循环可以严格控制植物细胞的FE丰度[gydF4y2Ba5.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba6.gydF4y2Ba］．植物已经进化了两种不同的机制，用于从根圈获得Fe以适应Fe缺陷的环境。策略I植物物种（所有Dicots和非禾本科单子叶植物）在至少三个步骤中应对Fe缺乏：（1）质子的释放以酸化H酸化gydF4y2Ba^+gydF4y2Ba-ATPase，（2）螯合肼还原酶（FCR）介导的铁螯合物还原酶活性，其催化了铁螯合物的减少到FegydF4y2Ba^{２＋gydF4y2Ba}(3)铁的吸收gydF4y2Ba^{２＋gydF4y2Ba}通过高亲和的金属转运体IRT1(铁调节转运体1)，负责运输铁gydF4y2Ba^{２＋gydF4y2Ba}进入根细胞[gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba7.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba8.gydF4y2Ba］．策略II植物物种(禾本科单子叶植物)对缺铁的反应分为四个步骤:(1)植物铁载体(muginetic acid, MAs)在根内的生物合成，(2)植物铁载体(PS)分泌到根际，(3)通过PSs螯合溶解土壤中不溶性铁，(4)根吸收铁-植物铁载体复合物[gydF4y2Ba9.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．gydF4y2Ba

植物在缺铁土壤中已经进化出一系列的生理和形态反应来维持铁的动态平衡。例如，basic helix-loop-helix (bHLH)作为一种转录调节元件，已被证实可以调节植物对缺铁的适应[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba］．Fe缺乏可以迅速诱导高表达水平gydF4y2BaBhlhs.gydF4y2Ba，而随后的Fe重新补充可以抑制gydF4y2BabHLHgydF4y2Ba表达[gydF4y2Ba12gydF4y2Ba］．此外，铁蛋白是一种铁储存蛋白，定位于质体中，在发育和应激条件下发挥作用。此外，叶片中的铁蛋白Fe可作为含铁蛋白形成的初始库，铁蛋白的积累可维持铁的稳态，并保护铁介导的氧化应激和非生物应激[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba那gydF4y2Ba13gydF4y2Ba］．在gydF4y2Ba拟南芥gydF4y2Ba，铁蛋白由多尾族编码[gydF4y2Ba14gydF4y2Ba］．在铁蛋白中，表达水平gydF4y2BaATTER1.gydF4y2Ba响应FE申请增加了[gydF4y2Ba15gydF4y2Ba］．gydF4y2Ba

几种植物激素特别参与缺铁反应的过程[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba那gydF4y2Ba16gydF4y2Ba］．例如，生长素在缺铁时根系的形态变化中起着至关重要的作用，缺铁导致生长素合成增加[gydF4y2Ba17gydF4y2Ba］．缺铁显著诱导乙烯过量产生，乙烯调控一系列铁获取基因的转录调控[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba那gydF4y2Ba19gydF4y2Ba］．脱落酸(ABA)通过促进铁从根向枝的运输和再分配来缓解缺铁引起的褪绿病[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba］．此外，另外三种其他激素，包括细胞素素（CTK），茉满半酸酯（JA）和芸苔类化合物（BRS），可以负面调节植物中的Fe缺乏响应[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba那gydF4y2Ba22gydF4y2Ba］．例如，外源CTK和甲基-JA治疗明显抑制植物中Fe采集相关基因的表达水平，例如gydF4y2Ba爱好者gydF4y2Ba那gydF4y2Bafro2.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba适合gydF4y2Ba[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba那gydF4y2Ba23gydF4y2Ba］．类似地，BRS作为类固醇激素，在植物对各种环境压力的反应中起重要作用。Wang等人。[gydF4y2Ba24gydF4y2Ba发现BR生物合成型突变体显示出与Fe缺乏的耐受性比野生型植物更高。Shen等人。[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]报道SA激活铁易位以适应缺铁环境。然而，其他信号分子与植物激素的相互作用是否参与了铁同化的调控尚不清楚。gydF4y2Ba

最近，许多研究表明硫化氢（HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS)作为一种类似于一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)的信号分子，在植物的各种生物过程中起着重要的作用。例如，以前的研究表明HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS促进种子萌发[gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]，减轻铜和铝胁迫的氧化损伤[gydF4y2Ba27gydF4y2Ba那gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]，抵消叶绿素损失[gydF4y2Ba29gydF4y2Ba]，并通过增强甘薯幼苗叶片抗氧化酶胁迫来缓解渗透胁迫[gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba］．此外，HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba植物中的S [gydF4y2Ba31gydF4y2Ba那gydF4y2Ba32gydF4y2Ba］．H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS通过增强多胺和糖的生物合成来诱导抗旱性gydF4y2BaSpinacia oleraceagydF4y2Ba苗(gydF4y2Ba33gydF4y2Ba］．此外，锌(Zn)毒性、镉(Cd)毒性和热应激均可被HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba年代(gydF4y2Ba34gydF4y2Ba那gydF4y2Ba35gydF4y2Ba那gydF4y2Ba36gydF4y2Ba那gydF4y2Ba37gydF4y2Ba］．H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS诱导气孔闭合并参与保护细胞中的脱离酸（ABA）依赖性信号通路[gydF4y2Ba38gydF4y2Ba］．我们以前的研究表明hgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS增强光合作用gydF4y2BaSpinacia oleraceagydF4y2Ba苗(gydF4y2Ba39gydF4y2Ba］．gydF4y2Ba

以前公布的研究表明，NO和CO通过影响植物中的FCR活性和Fe同化相关基因表达来调节Fe代谢[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba那gydF4y2Ba18gydF4y2Ba那gydF4y2Ba40gydF4y2Ba］．有趣的是,HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS改进策略II工厂(gydF4y2Ba玉米gydF4y2Ba)通过增加根对铁的吸收和叶对铁的运输来适应缺铁[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．然而，与策略II植物相反，无论是hgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS参与调节策略，我植物对Fe缺乏的反应仍然不清楚。gydF4y2Ba

目前工作的目的是调查如何gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS可改善大豆幼苗缺铁现象。我们的假设是HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS对大豆幼苗应对缺铁有有益的影响。为了检验这一假设，我们考察了HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba使用生理和转录组织方法对大豆幼苗根系的Fe储存和可用性。gydF4y2Ba

NaHS抑制缺铁条件下的干生物量和叶绿素损失gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

以NaHS作为外源HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaHosoki等人所描述的S捐赠者[gydF4y2Ba41gydF4y2Ba］．NaHS成功地抑制了无NaHS营养液和1μΜ Fe(III)-EDTA处理15 d大豆植株的缺铁症状(图。gydF4y2Ba1gydF4y2Baa）。相比之下，没有Nahs生长的植物变得严重褪黄。然而，在Fe - 足够的（+ Fe）条件下，NaHs对大豆生长表型的影响不显着（图。gydF4y2Ba1gydF4y2Baa). NaHS处理15 d后，与未处理相比，缺铁(−Fe)植株叶片、茎和根的干重显著增加gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS对+Fe植株的干重无影响(表1)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.此外，在处理15 d后，叶绿素含量显着降低，但是NaHs显着抑制了大豆叶中的Fe缺乏诱导的叶绿素损失（表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.此外，在+Fe条件下，NaHS也显著提高了大豆叶片叶绿素含量(表2)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.区分H的作用gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS来自其他含硫衍生物和钠，一系列含硫和含钠的化学物质，包括Nahs，NagydF4y2Ba_2gydF4y2Ba年代,NagydF4y2Ba_2gydF4y2Ba所以gydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba，nagydF4y2Ba_2gydF4y2Ba所以gydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba, NaHSOgydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba, NaHSOgydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba， NaAC (100 μM)处理缺铁条件下的大豆幼苗。缺铁处理15 d后，叶绿素含量并没有引起Na的显著增加gydF4y2Ba^+gydF4y2Ba或与NaHS处理相比的其他含硫化合物处理（图SgydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.gydF4y2Ba

进一步阐明HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS介导的Fe缺陷应力时间过程实验的改善以研究相关生理指标的动态。例如，在-Fe条件下，总干生物质在-FE条件下的NaHS处理的植物中具有明显的增加（图。gydF4y2Ba1gydF4y2Bab），并保持大致相同的高浓度叶绿素（1.2mg ggydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}FW）仅在+ Fe处理下（图。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba而在+Fe条件下，NaHS对全处理期干生物量没有显著影响，但显著提高了叶绿素含量(图2)。gydF4y2Ba1gydF4y2BaC和e）。gydF4y2Ba

Nahs治疗增加了铁积累gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

NaHS处理的植物中的Fe浓度明显高于对照组（在-Fe的植物中未在15d条件下（表）（表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.例如，与未与NaHs治疗的人相比，Fe浓度在NaHS处理的植物的叶片中增加了30％（表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.此外，在+Fe条件下，NaHS处理的植物根系中Fe含量增加了2倍以上，但叶和茎中的Fe含量不受NaHS的影响(表)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.gydF4y2Ba

NaHS调节根沐浴溶液，FCR活性和根部妊娠Fe含量的pH值，以熨斗采集gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

在-FE治疗的全部期间，根浴溶液的pH从7.3〜6.1大大降低，但是与单独的-Fe处理中的那些相比，NaHS处理的植物仅缓慢降低（图。gydF4y2Ba2gydF4y2Baa）。然而，在+ Fe处理下，沐浴溶液的pH在9和12d中显示出+ Fe和+ Fe + NaHS处理之间的显着差异，但在任何其他时间点没有发现显着差异（图。gydF4y2Ba2gydF4y2Bab).在-Fe处理的整个过程中，不同NaHS处理的FCR活性差异很大(图2)。gydF4y2Ba2gydF4y2Bac）。在前3天中，NaHS处理的植物中FCR活性比单独的-FE处理显着更高（图。gydF4y2Ba2gydF4y2Bac)。然而，从第6 d到试验结束，nahs处理植株的FCR活性逐渐下降(图。gydF4y2Ba2gydF4y2Bac）。在+ Fe治疗下，除了3d之外，NaHs在整个实验期间没有显着影响FCR活性（图。gydF4y2Ba2gydF4y2Bad).质外铁是植物中主要的铁库之一。在3 d和9 d, nahs处理植株的根内质铁含量分别比单独处理降低了11.1和19.8%(图4)。gydF4y2Ba2gydF4y2Bae）。在+ Fe条件下，除了12d的实验期外，Nahs并没有显着影响根部的痉挛Fe含量（图。gydF4y2Ba2gydF4y2Baf)。gydF4y2Ba

nahs对内源性h的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS、谷胱甘肽和NPTs的含量gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

内源性H的高积累gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下观察了外源NaHS对大豆幼苗叶片和根系S的影响(表2)gydF4y2Ba2gydF4y2Ba）.此外，通过在-Fe和+ Fe条件下的NaHs外源施加叶片和根部的NPT含量增加（表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba）.另外，叶片和根部的GSH含量减少5.3倍，在-FE条件下分别增加了5.3倍，14％。同样地，在+ Fe条件下，在大豆幼苗中，Nahs的GSH和根中的GSH含量得到增强（表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba）.gydF4y2Ba

NaHS对不同基因表达影响的转录组分析gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物对缺铁的反应gydF4y2Ba

我们构建了12个样本(每个处理3个重复)的RNA-Seq文库。利用Illumina Hiseq 4000平台对这些RNA文库进行测序，共得到50,315 998(−Fe)、56,902,806(−Fe + NaHS)、60,885,868 (+Fe + NaHS)和50,140 356 (+Fe + NaHS)序列reads(表S)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.每个处理的数据复制率都很高，RgydF4y2Ba^2gydF4y2Ba约为0.9（图SgydF4y2Ba6.gydF4y2Ba）.表S概述了测序和组装的概况gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和表S.gydF4y2Ba2gydF4y2Ba．我们汇集了短读，并将它们与大豆基因组对齐，发现大约87.31-89.19％的读数映射到基因（表SgydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.gydF4y2Ba

基于本研究中的12个文库的深度测序，从Fe缺乏治疗中的大豆根检测到54,718个基因，其在大豆中的至少82％的参考基因中覆盖。此外，在使用条件下，NaH的施加受影响5606℃，其中2368是上调基因，3238是下调的基因（图SgydF4y2Ba7.gydF4y2Ba同样，在+Fe条件下，NaHS调控6121个DEGs，其中2721个为上调基因，3400个为下调基因(图S)gydF4y2Ba7.gydF4y2Bab）。在这些次数中，在-FE和+ Fe条件下，分别通过NaHs共同上升和 - 在-FE和+ Fe条件下进行309和980℃。（图。gydF4y2Ba5.gydF4y2Baa）。这些上调和下调的DEG在图1中聚集。gydF4y2Ba3.gydF4y2Bac。详细信息列于表s中gydF4y2Ba5.gydF4y2Ba-gydF4y2Ba8.gydF4y2Ba．此外，为了了解DEGs的功能，我们使用KEGG通路网络来识别它们在不同代谢通路中的富集。显著富集的KEGG通路通过agydF4y2BaP.gydF4y2Ba-基于超几何分布的。例如，在-Fe条件下，NaHS处理显著富集了20条途径。KEGG通路网络分析表明，在-Fe条件下，“硫代谢”、“植物激素信号转导”、“代谢”、“卟啉和叶绿素代谢”、“半胱氨酸和蛋氨酸”等均显著富集(图2)。gydF4y2Ba3.gydF4y2Bab）。同时，去分析在图4中列出了gydF4y2Ba8.gydF4y2Ba．gydF4y2Ba

NaHS调控缺铁患者体内铁稳态相关基因的表达gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

转录组数据显示，铁稳态相关基因包括3gydF4y2BaH.gydF4y2Ba^+gydF4y2Ba腺苷三磷酸酶gydF4y2Ba（gydF4y2Ba哈gydF4y2Ba）基因，2gydF4y2BaBhlhs.gydF4y2Ba基因和2种丁辛基因（gydF4y2Ba拿来gydF4y2Ba），在-Fe和+ Fe条件下由NaHs调节（通过图3中的聚类呈现转录组数据。gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba）.为了进一步确认转录组结果，我们采用了qRT-PCR方法(qRT-PCR数据以图中的柱状图显示)。gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba）.如图1所示。gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba，表达水平为3gydF4y2BaGmHAsgydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下的NaHS处理中上调基因。此外，QRT-PCR结果还表明，NaHs显着促进了曲折的质量gydF4y2BaGMHAgydF4y2Ba基因在相同条件下。另外，表达丰富的gydF4y2BaGmFRO2gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMFRO7.gydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS明显降低。相比之下，表达水平的gydF4y2BaGMFCR.gydF4y2Ba在相同条件下，NaHS显著增强。此外，在+Fe条件下，NaHS影响表达丰度gydF4y2BaGMFRO7.gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMFCR.gydF4y2Ba在大豆幼苗的根部。此外，转录组数据显示，2gydF4y2BaGmbhlhs.gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下明显增加了NaH，并且QRT-PCR分析进一步证实了这些结果。的表达水平gydF4y2BaGmIRTgydF4y2Ba和gydF4y2BaGmDMT1gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下，NaHS显著下调。最后,2gydF4y2BaGmfersgydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS的表达水平不受NaHS的影响，但在+Fe条件下，这两个基因的表达水平较-Fe处理显著升高。同样，qRT-PCR分析也表明，Fe和NaHS可以明显提高表达水平gydF4y2BaGMFER2.gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMFER4.gydF4y2Ba大豆幼苗根部的基因。gydF4y2Ba

Nahs影响硫缺陷中硫的代谢相关基因的表达gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

硫代谢相关基因，包括gydF4y2Ba公司gydF4y2Ba那gydF4y2Bagmatps.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmAPKgydF4y2Ba那gydF4y2BaGmAPRgydF4y2Ba那gydF4y2BaGmSiRgydF4y2Ba那gydF4y2BaGMSAT.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmOAS-TLgydF4y2Ba那gydF4y2BaGmCGSgydF4y2Ba那gydF4y2BaGMCBL.gydF4y2Ba,gydF4y2BaGmmets.gydF4y2Ba，通过使用转录组法在-Fe和+ Fe条件下的大豆根系中的NaH被调节（图。gydF4y2Ba5.gydF4y2Baa）。6的表达丰富gydF4y2BaGMSTS.gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下，NaHS显著增强了大豆根系中基因的表达。gydF4y2Ba5.gydF4y2Baa）。同样，QRT-PCR结果表明，NAHS显着上调了表达gydF4y2BaGMST2.1gydF4y2Ba在-Fe植物的根中，但这种基因表达水平略微降低+ Fe条件下（图。gydF4y2Ba5.gydF4y2Bab). 2的表达水平gydF4y2Bagmatps.gydF4y2Ba与在大豆幼苗根系中的存在或不存在的植物中，基因与未在豆幼苗根系中的存在或不存在的植物中没有用NaH治疗的植物，基因显示出明显的增加;QRT-PCR分析进一步证实了这些结果（图。gydF4y2Ba5.gydF4y2Ba）.此外，Nahs显然增加了3的表达水平gydF4y2BaGMAPRgydF4y2Ba-Fe植物根的基因。而在+Fe条件下，NaHS明显降低了这三个基因的表达量。类似地，2的表达式gydF4y2BaGmSiRgydF4y2Ba和gydF4y2BaGmAPKgydF4y2BaNaHS在-Fe和+ Fe条件下上调基因表达。表达层次为5gydF4y2BaGMSAT.gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe植物的根部，Nah改变基因，QRT-PCR数据表明gydF4y2BaGmSAT1gydF4y2Ba基因表达水平在-FE条件下由NaH升调，但在+ Fe植物中不受影响（图。gydF4y2Ba5.gydF4y2Ba）.此外，3的表达丰富gydF4y2BaGmOAS-TLgydF4y2BaNaHS处理对-Fe植物的基因表达增强，而在+Fe条件下这3个基因表达显著下调。的基因表达水平gydF4y2BaGMCYS.gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下，NaHS上调。此外，表达丰富gydF4y2BaGmCGSgydF4y2Ba和gydF4y2BaGMCBL.gydF4y2Ba在大豆幼苗根系中明显被NaH诱导，并且QRT-PCR数据进一步证实了这一结果。有趣的是，Nahs治疗略微抑制了表达水平gydF4y2BaGMDES.gydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS显著上调了该基因的表达量。最后，5gydF4y2BaGmMetSsgydF4y2Ba基因在-Fe和+ Fe条件下受到NaHS不同程度的影响，qRT-PCR数据表明，NaHS处理可上调大豆幼苗根系中基因的表达丰度。此外，我们还分析了其他硫或应激相关基因，包括gydF4y2BaGMYAM-MTase.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGMGR.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmGSTgydF4y2Ba,gydF4y2BaGmGDH1gydF4y2Ba，在-Fe植物根中进行qRT-PCR检测。的表达水平gydF4y2Ba格斯克gydF4y2Ba和gydF4y2BaGmGSTgydF4y2Ba在大豆幼苗根系中的NaHs下，在核心条件下显着下调，但在相同的条件下，NaHs治疗确实影响了表达丰富的gydF4y2BaGMYAM-MTase.gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMGR.gydF4y2Ba基因。但是，表达水平gydF4y2BaGmGDH1gydF4y2BaNaHS在-Fe条件下显著上调基因表达，而在+Fe条件下则相反。gydF4y2Ba

植物激素在Nahs诱导的熨缺乏症中发挥着重要作用gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

如图1所示。gydF4y2Ba6.gydF4y2Ba，在生长素途径中，1gydF4y2BaGmTIR1gydF4y2Ba和3gydF4y2BaGmARFsgydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下，NaHS显著增加了大豆幼苗根系中基因的表达。相比之下，12gydF4y2BaGmAUX / IAAgydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下，NaHS均下调s基因。同样的，大多数gydF4y2BaGMGH3.gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMSAur.gydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS治疗明显降低了表达水平。此外，在Cytokinine（CTK）途径中，NaHS治疗显着下调了表达水平gydF4y2BaGmCRE1, GmAHPgydF4y2Ba那gydF4y2BaGMA-Arr.gydF4y2Ba和2gydF4y2BaGmb-arr.gydF4y2Ba在-Fe条件下，其他5个基因的表达量均有所下降gydF4y2BaGmb-arr.gydF4y2Ba大豆幼苗根中基因表达上调。相反，在赤霉素(gibberellin, GA)通路中gydF4y2BaGmGID1gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMDella.gydF4y2Ba在-FE条件下，NaHS治疗明显上调，但是gydF4y2BaGmTFgydF4y2Ba在相同条件下显然是下调的。此外，NAHS治疗显着降低了基因表达水平gydF4y2BaGMPP2CgydF4y2Ba那gydF4y2BaGmSnRK2gydF4y2Ba,gydF4y2BaGmABFgydF4y2Ba在-Fe条件下的脱离酸（ABA）途径中。尽管如此，2gydF4y2Bagmpyt / pyl.gydF4y2Ba大豆幼苗根中基因表达上调。在乙烯（Eth）途径中，所有基因的表达水平，包括gydF4y2BaGMETR.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGMCTR1gydF4y2Ba那gydF4y2Bagmein2gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmEBF1/2gydF4y2Ba那gydF4y2Bagmein3.gydF4y2Ba,gydF4y2BaGmERF1/2gydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS显著下调了大豆幼苗根系的叶绿素含量。此外，在油菜素内酯(brassinosteroids, BR)通路中gydF4y2BaGmabak1.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmBKI1gydF4y2Ba那gydF4y2BaGMTCH4.gydF4y2Ba,gydF4y2BaGmCYCD3gydF4y2BaNaHS明显降低了-Fe植物根系中的基因含量。然而，表达丰度gydF4y2BaGmBRI1gydF4y2Ba和gydF4y2BaGmbsk.gydF4y2Ba在相同条件下得到增强。此外，在-Fe条件下，NaHS处理显著下调了大豆幼苗根系中含有茉莉酸(JA)途径的所有基因gydF4y2Bagmjar1gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmCOI1gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmJAZgydF4y2Ba,gydF4y2BaGMMYC2gydF4y2Ba．最后，表达丰富的gydF4y2BaGmTGAgydF4y2Ba和gydF4y2BaGMPR-1gydF4y2Ba在-FE条件下由NaHS治疗显着下调。gydF4y2Ba

植物激素的含量受到-FE条件下的NaH的影响（图。gydF4y2Ba7.gydF4y2Ba）.例如，NaHS治疗在-Fe植物的叶片中显着降低了ABA和ZA（Zeep，Za，植物中的天然细胞质），但在根中这种差异并不明显（图。gydF4y2Ba7.gydF4y2Baa，b）。相比之下，在-FE条件下，NaHs的叶片和根叶中的GA含量增加，但GA含量显示在+ Fe条件下明显减少（图。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bac）。此外，在-FE条件下，NaHs明显增加了大豆幼苗叶片中的IAA含量，但是在相同条件下，NaHs治疗降低了根部的IAA含量（图。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bad).在-Fe条件下，NaHS处理促进了叶片中游离SA的合成，但降低了根系中游离SA的含量(图2)。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bae）。相比之下，叶片中的结合SA含量显示出略微降低，但在-Fe和+ Fe条件下的根部增加（图。gydF4y2Ba7.gydF4y2Baf). NaHS在-Fe条件下略微提高了叶片JA含量，而在+Fe条件下降低了JA含量(图2)。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bag）。此外，NaHs并未影响在咖啡和+ Fe条件下的根源中的JA含量（图。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bag）。gydF4y2Ba

NaHS调控缺铁患者有机酸代谢相关基因的表达和有机酸含量gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

有机酸代谢相关基因在-Fe植物根系中的表达丰度受NaHS调控(图2)。gydF4y2Ba8.gydF4y2Baa）。例如，表达水平为2gydF4y2BaGMCS.gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下，基因受到NaH的影响，QRT-PCR数据显示NaH上调的基因表达水平gydF4y2BaGMCS.gydF4y2Ba在咖啡条件下，但在+ Fe条件下没有发现显着效果。另外，表达水平gydF4y2BaGmACOgydF4y2Ba那gydF4y2BaGmOGHgydF4y2Ba和gydF4y2BaGMSDH.gydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下，NaHS明显上调基因表达。同样，NaHS处理也显著提高了的基因表达水平gydF4y2BaGMMS.gydF4y2Ba在大豆幼苗根系中的咖啡和+ fe条件下。此外，表达丰富的2gydF4y2BaGMMDHS.gydF4y2BaqRT-PCR结果显示，在-Fe条件下，NaHS略微下调了这些基因的表达水平，而在+Fe条件下，这些基因的表达水平显著上调。此外，我们还分析了-铁和+铁条件下大豆幼苗叶片和根系中柠檬酸和苹果酸的含量。如图1所示。gydF4y2Ba8.gydF4y2Bab，在-Fe和+ Fe条件下，NaHS处理显著提高了叶片中的柠檬酸含量，而在根系中，NaHS处理在-Fe条件下略微降低了柠檬酸含量。而-Fe植物叶片中苹果酸含量对NaHS处理的响应明显降低。gydF4y2Ba

H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS调节铁缺乏植物中叶绿素生物合成和光合作用gydF4y2Ba

大豆(gydF4y2Ba大豆gydF4y2BaL.）是属于豆科植物家族的农艺作物，是植物物种，具有第二最高铁（Fe）含量[gydF4y2Ba42gydF4y2Ba］．大豆对缺铁褪绿症特别敏感[gydF4y2Ba42gydF4y2Ba］．暴露于Fe缺乏，叶绿素生物合成和光合作用被显着抑制，对大豆产量产生负面影响[gydF4y2Ba42gydF4y2Ba那gydF4y2Ba43gydF4y2Ba］．缺铁导致叶绿素生物合成降低，进而导致幼叶黄变，叶面积和地上根干重减少[gydF4y2Ba44gydF4y2Ba那gydF4y2Ba45gydF4y2Ba］．此外，Fe对豆类共生根结节的建立和功能至关重要，参与氮固定[gydF4y2Ba46gydF4y2Ba那gydF4y2Ba47gydF4y2Ba］．在低碳条件下，豆科植物可能需要制定参与收购和利用Fe的机制，以保护其共生器官免受FE的低可用性[gydF4y2Ba48gydF4y2Ba］．因此，大豆可以用作理解Fe缺乏耐受机制的新模型工厂。在本研究中，我们的研究结果表明，与Fe充足相比，Fe缺乏可能会显着抑制结节数并降低大豆植物中的结节干重，但是NaHs的应用可以显然可以减轻结核数量和干燥的Fe缺乏诱导的降低大豆植物的重量（图.. SgydF4y2Ba2gydF4y2Ba此外，在+Fe条件下，NaHS也能促进大豆植株的根瘤数量和根瘤重量(图SgydF4y2Ba2gydF4y2BaA和B).这些结果与先前的研究一致，即低铁条件可以抑制豆科植物根瘤的数量[gydF4y2Ba46gydF4y2Ba那gydF4y2Ba47gydF4y2Ba］．此外，缺铁破坏叶绿体超微结构，降解叶绿体蛋白质成分[gydF4y2Ba7.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba40gydF4y2Ba]，进一步抑制植物中的光合作用和光系统II [gydF4y2Ba7.gydF4y2Ba］．在本研究中，经历Fe缺乏15d的大豆幼苗呈现出具有间的叶片繁殖和低叶绿素浓度（图。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.同样地，氯仑阳炎的典型表型gydF4y2Ba拟南芥gydF4y2Ba据报道，在FE缺陷溶液中生长的番茄和玉米幼苗[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba那gydF4y2Ba11gydF4y2Ba那gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba］．有趣的是，NaHS显著提高了缺铁大豆幼苗的叶绿素含量，这与我们之前的研究结果一致gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS促进玉米幼苗在缺铁条件下叶绿素合成，一种策略II植物[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．此外，缺铁导致叶绿素减少，导致植物光合作用和光系统II减少[gydF4y2Ba49gydF4y2Ba］．此外，由Fe缺乏症引起的氯化叶片表现出较低的气孔孔和较低的光合速率，并且在WUE的最终减少[gydF4y2Ba50gydF4y2Ba］．此外，Fe缺陷会影响光合电子传输，持续减少碳同化和生物量[gydF4y2Ba51gydF4y2Ba］．在本研究中，光响应曲线表明，NaHs促进了光合作用，并且该过程与Fe缺陷植物中的Fe采集密切相关（图。gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba此外，NaHS也显著提高了水分利用效率(WUE)(图SgydF4y2Ba3.gydF4y2BaD).在我们之前对玉米幼苗在缺铁溶液中生长的研究中也得到了同样的结果[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．在-Fe和+ Fe条件下，NaHS对大豆幼苗光合作用和光系统II的响应不同。例如，在-Fe条件下，NaHS的施用可以促进光合作用和叶绿素荧光参数，包括PSII、ETR、Fv/Fm、Fv ' /Fm '等，但在+Fe条件下，这种响应不明显，甚至出现下降(图SgydF4y2Ba3.gydF4y2Ba和SgydF4y2Ba4.gydF4y2Ba）.可能的解释是在-Fe条件下，HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS在保护植物免受缺铁损伤方面发挥着积极的作用，但在+Fe条件下，植物可以正常生长发育，不需要其他信号分子，如HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS.在Fe缺陷条件下，玉米幼苗也发现了同样的现象[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．类似地，ABA或Putrescine对植物中的-Fe和+ Fe条件之间的生理指标具有不同的反应[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba52gydF4y2Ba］．一起服用，上述结果表明hgydF4y2Ba_2gydF4y2Bas对大豆幼苗光合作用和光系统II的改善可能与铁的有效性有关。gydF4y2Ba

H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS通过在铁缺陷植物中改变FCR酶活性和铁稳态相关基因表达来促进铁累积gydF4y2Ba

Fe Socosuttasis相关基因在植物中调节Fe吸收和易位[gydF4y2Ba53gydF4y2Ba[和Fe缺乏诱导的氯化是从旧叶子的限制的Fe Mobilis。在本研究中，NaH在-FE条件下大豆幼苗组织中的Fe积累显着改善了Fe积累（表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）.此外，高铁浓度并不影响其他微量元素(Mn、Cu和Zn)的缺乏(图SgydF4y2Ba5.gydF4y2Ba）.这些结果与前一项研究的结果一致表明，没有和ABA调节番茄和拟南芥的Fe积累和运输[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba那gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba］．此外，表皮细胞膜中的三个连续活动参与了大豆植物根部对铁的吸收[gydF4y2Ba42gydF4y2Ba］．质子通过细胞膜结合的HgydF4y2Ba^+gydF4y2Ba- 表皮细胞中的蛋白酶（AHA）是第一活性。然后，第二次活动是fegydF4y2Ba^{3 +gydF4y2Ba}减少到可溶性FegydF4y2Ba^{２＋gydF4y2Ba}货物收据。最后，铁调节转运体1 (IRT1)转运铁gydF4y2Ba^{２＋gydF4y2Ba}离子进入表皮细胞[gydF4y2Ba8.gydF4y2Ba］．在本研究中，我们发现在处理期间缺铁诱导的大豆幼苗根系FCR活性增加，但NaHS抑制了缺铁诱导的根系FCR活性的增加(图。gydF4y2Ba2gydF4y2Bac)，暗示gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS在植物缺铁反应中起着重要的调节作用。同样，之前的研究发现FCR活性与大豆植株中的铁浓度有关[gydF4y2Ba54gydF4y2Ba］．通过质子ATPase介导的根际酸化是策略I植物的另一个重要的Fe缺乏症，并且这种反应与Plasmalemalocalized H的活性有关gydF4y2Ba^+gydF4y2Ba-ATPase。有趣的是，NaHs显着抑制了TeaT沐浴溶液的pH的Fe缺乏诱导的降低。此外，最近的证据表明，在Fe缺陷下可以部分重新加入根吻斗塑料Fe [gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba55gydF4y2Ba］．图中，在缺铁条件下，根的质外体铁含量明显下降，在NaHS存在下下降更明显(图2)。gydF4y2Ba2gydF4y2Bae），表明HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS促进大豆幼苗根质外体铁的再利用。这一过程的可能机理如下gydF4y2Ba_2gydF4y2Bas与固定在术中固定的Fe反应，使得通过根细胞吸收的Fe用于易于拍摄。gydF4y2Ba

我们使用转录组和RT-PCR方法来分析Fe Socyostasis相关基因表达丰富，这使得更好地了解Fe缺乏诱导的氯化和H的作用gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在铁的获取和光合作用中。我们的研究结果表明，NaHS显著刺激了gydF4y2BaGMHAgydF4y2Ba在Fe缺乏症条件下的基因，这些结果与先前研究的结果一致，表明NO和其他信号分子可以通过影响质子ATP酶来调节Fe缺陷的响应（gydF4y2Ba啊哈gydF4y2Ba)基因表达[gydF4y2Ba52gydF4y2Ba那gydF4y2Ba56gydF4y2Ba那gydF4y2Ba57gydF4y2Ba］．此外，以往的研究表明，表达上调gydF4y2BaFCR.gydF4y2Ba和gydF4y2Ba爱好者gydF4y2Ba预计将增加根系中的Fe习得，从而加强植物耐受Fe缺陷[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba51gydF4y2Ba那gydF4y2Ba52gydF4y2Ba］．我们的结果表明表达水平gydF4y2BaGMFCR.gydF4y2Ba在缺铁条件下，NaHS明显增加，而其他两个基因，如gydF4y2BaGmFRO2gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMFRO7.gydF4y2Ba，在相同条件下显著下调(图。gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba）.对这种现象的一个可能的解释是hgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS-DELVEDIED FE缺乏响应主要增加了表达gydF4y2BaGMFCR.gydF4y2Ba而不是丰富的表达gydF4y2BaGmFRO2gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMFRO7.gydF4y2Ba在大豆。铁蛋白充当Fe储存蛋白，并在Fe缺陷条件下发挥Fe Mobilization和Passion的主要作用[gydF4y2Ba15gydF4y2Ba那gydF4y2Ba58gydF4y2Ba］．此外，铁蛋白主要位于叶绿体中并在植物中使用足够的Fe时积聚。在这里，表达gydF4y2BaGMFER2.gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMFER4.gydF4y2Ba被NaHS上调(图。gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba)，表明HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba通过调节大豆幼苗中的铁蛋白丰度，促进了Fe缺乏条件下的Fe Mobilization和分布。同样，此前的研究还表明NO和谷胱甘肽促进铁蛋白mRNA和蛋白质的积累gydF4y2Ba拟南芥gydF4y2Ba[gydF4y2Ba58gydF4y2Ba那gydF4y2Ba59gydF4y2Ba］．此外，之前的研究表明，BHLHS作为转录者调节剂，在维持植物中的Fe SoosoTasis中起着关键作用。在这里，表达gydF4y2BagmbhlhgydF4y2Ba在-Fe和+ Fe条件下增加NaH（图。gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba)，表明HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS通过影响转录调节子的表达丰度来促进大豆幼苗对缺铁的适应性。大豆二价金属转运体1 (GmDMT1)是一种二价金属离子转运体NRAMP/DMT1家族的大豆同源物gydF4y2BaGmDMT1gydF4y2Ba在铁结核内环境平衡中起重要作用[gydF4y2Ba60.gydF4y2Ba］．同样，我们发现Fe缺陷诱导更高的表达gydF4y2BaGmDMT1gydF4y2Ba，但NaHS抑制了- fe诱导的大豆根中该基因表达的增加(图。gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba）.综合来看，这些结果表明HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS是用于在-FE和+ Fe条件下的大豆幼苗中表达铁稳态相关基因和相关酶活性的必要信号分子。gydF4y2Ba

H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS可以通过调节含硫代谢物和硫代谢相关基因的表达来应对铁缺乏gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

以前的研究表明，有限的S可用性降低了Fe摄取，并且Fe缺乏导致硫酸盐摄取和同化的调节[gydF4y2Ba61.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba62.gydF4y2Ba］．值得注意的是，S的供应可以帮助工厂应对铁短缺[gydF4y2Ba61.gydF4y2Ba］．例如，番茄幼苗在植物的S营养状况与其应对Fe缺乏的能力之间表现出阳性相关性，这与FCR活性，IRT表达和编码硫酸盐转运蛋白（STS）的基因的表达有关（STS）[gydF4y2Ba61.gydF4y2Ba］．此外，Zuchi等人。[gydF4y2Ba63.gydF4y2Ba]显示，在暴露于S和Fe饥饿的番茄植物中，不诱导FCR活性，但缺乏似乎似乎防止了对Fe缺乏的典型反应的发展，并且Fe缺乏显着上调了属于的大多数硫酸盐转运蛋白基因对于Group1,2和4.先前的结果表明，S和Fe之间的这种相互作用触发了复杂响应机制的激活，以假设植物正常生长和发育。然而，与之前的研究不同，我们的研究主要集中在H的功能上gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS信号传导而不是硫营养，从而改善大豆幼苗对Fe缺乏的调整。例如，在-fe和+ Fe条件下，NaHs导致高源性H的积累gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS、谷胱甘肽和NPTs在大豆幼苗叶片和根系中的含量gydF4y2Ba2gydF4y2Ba）.这些结果表明，NaHs不仅直接促进了内源性H的合成gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS，但也通过在根中调节硫代谢相关的基因表达来喂入半胱氨酸和GSH合成。gydF4y2Ba

植物中硫同化的途径分为两个反应序列:硫酸盐还原和半胱氨酸合成[gydF4y2Ba64.gydF4y2Ba］．通过转录组和qRT-PCR分析，我们发现大豆幼苗根系中大多数硫同化相关基因在-Fe和+ Fe条件下受到NaHS的调控(图)。gydF4y2Ba5.gydF4y2Ba）.例如，NaHS增加了gydF4y2Baoastl.gydF4y2Ba基因和减少gydF4y2BaDES.gydF4y2Ba玉米幼苗的基因表达[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．同样的现象在gydF4y2BaS. Oleracea.gydF4y2Ba苗(gydF4y2Ba39gydF4y2Ba］．此外，在-Fe条件下，NaHS通过影响基因表达水平显著提高了蛋氨酸的生物合成gydF4y2BaGmmets.gydF4y2Ba．最后，我们发现其他含s的化合物或酶，如GR、GST和GDH的转录丰度都是由H调控的gydF4y2Ba_2gydF4y2Bas低于咖啡和+ fe条件。因此，得出结论是gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS作为信号分子，可以通过增加含硫代谢物和调节大豆幼苗硫代谢相关基因的转录丰度来应对缺铁。gydF4y2Ba

植物激素在H中发挥着重要作用gydF4y2Ba_2gydF4y2Bas能缓解体内缺铁gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

植物激素和信号分子通过诱导铁获取和稳态相关基因的表达参与策略I植物对铁缺乏的响应[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba那gydF4y2Ba25gydF4y2Ba］．例如，在助线信令路径中，gydF4y2BaGmAUX / IAAgydF4y2Ba那gydF4y2BaGMGH3.gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMSAur.gydF4y2Ba在-Fe条件下被NaHS下调，但其他两个基因，gydF4y2BaGmTIR1gydF4y2Ba和gydF4y2BaGmARFgydF4y2Ba，在相同条件下显著上调。此外，我们的研究结果表明，在-Fe条件下，NaHS降低了根中生长素IAA的合成，但增加了叶中生长素IAA的合成(图2)。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bad），建议hgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS通过影响大豆幼苗生长素水平和生长素相关基因表达丰度来调控铁缺乏的适应性。同样，aux1介导的生长素分布对缺铁依赖的侧根伸长是必需的[gydF4y2Ba65.gydF4y2Ba］．此外，以往的研究表明，缺铁会导致生长素合成增加，高浓度的生长素也会增强与铁同化相关的基因表达[gydF4y2Ba56gydF4y2Ba那gydF4y2Ba66.gydF4y2Ba］．此外，我们的结果表明HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba通过影响植物中的肉毒蛋白（Za）含量，植物中的天然细胞素素（CTK），在-FE条件下，通过影响植物中的天然细胞素素（CTK），对植物中的CTK相关基因表达丰度进行降低调节CTK相关基因表达丰度来调节FE同化。先前的研究表明，作为Fe缺乏响应的负调节剂的CTK显着抑制了几种相关基因，例如gydF4y2BaIRT1gydF4y2Ba和gydF4y2Bafro1.gydF4y2Ba[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]，按照我们的研究。在FE条件下，NaHS通过抑制大豆幼苗中CTK和CTK相关基因表达水平的合成增强了对Fe缺乏的适应性（图。gydF4y2Ba6.gydF4y2Ba和gydF4y2Ba7.gydF4y2Bab).此外，在赤霉素(gibberellin, GA)信号通路中，基因表达丰度gydF4y2BaGmGID1gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMDella.gydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS处理明显上调TF的表达，而在相同条件下TF的表达略有下调。在-Fe条件下，NaHS增加了叶片和根系中的GA含量(图2)。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bac)，暗示gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba通过上调表达式，S信令可以通过um-conse表达来肯定控制GA水平gydF4y2BaGmGID1gydF4y2Ba和gydF4y2BaGMDella.gydF4y2Ba在Fe缺乏条件下的大豆植物中。有趣的是，外源性施用的气体在Fe缺陷和Fe - 充足条件下诱导了几种Fe摄取相关基因的表达gydF4y2Ba拟南芥gydF4y2Ba[gydF4y2Ba67.gydF4y2Ba］．此外，先前的研究表明，Ga信号传导通过调节表达丰度来控制Fe含量gydF4y2Ba德拉斯gydF4y2Ba和gydF4y2Ba适合gydF4y2Ba- 相关的转录因子基因[gydF4y2Ba68.gydF4y2Ba］．同样，在-Fe条件下，NaHS降低了ABA信号通路相关基因的表达丰度。此外，在-Fe条件下，NaHS抑制了叶和根中ABA的合成(图2)。gydF4y2Ba7.gydF4y2Baa），建议hgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS可能调控缺铁条件下ABA的合成和相关基因的表达丰度。已有研究表明，外源ABA处理通过促进铁在茎根之间的运输和再分配，缓解了铁缺乏引起的褪绿病[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba］．外源ABA的施用通过调控铁的表达水平，明显提高铁的吸收gydF4y2BaCmbHLH1gydF4y2Ba在菊花中，表明ABA可以在Fe吸收过程中被肯定地调节[gydF4y2Ba69.gydF4y2Ba］．在策略I植物中，通过乙烯（Eth）控制一系列Fe收集基因的转录调节[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba那gydF4y2Ba19gydF4y2Ba那gydF4y2Ba70gydF4y2Ba］．此外，乙烯反应因子gydF4y2BaAterf4.gydF4y2Ba负面调节FE缺陷的反应gydF4y2Ba拟南芥gydF4y2Ba[gydF4y2Ba70gydF4y2Ba］．有趣的是，我们的研究结果表明，一系列乙烯信号通路相关基因的转录调控是由HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在-Fe条件下，乙烯与HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS调节大豆幼苗的Fe缺陷反应。另外，芸苔类固醇（BR）信号传导途径相关基因的表达丰度受到NaHs的影响。BRS调节植物中的许多生理过程[gydF4y2Ba71.gydF4y2Ba］．它们在调节对Fe缺乏的反应方面发挥着重要作用，BR生物合成型突变体呈现出比野生类型更大的耐受性，这表明BRS充当Fe缺乏响应的负调节剂[gydF4y2Ba72.gydF4y2Ba］．茉莉酸酯(JAs)参与调节植物缺铁[gydF4y2Ba23gydF4y2Ba那gydF4y2Ba73.gydF4y2Ba］．JAs信号在水稻根系缺铁反应的早期就被激活，这部分是由转录因子调控的gydF4y2BaIDEF1.gydF4y2Ba以及泛素连接酶gydF4y2BaOSHRZgydF4y2Ba[gydF4y2Ba73.gydF4y2Ba］．许多JA信号相关基因的成绩单丰富，包括gydF4y2Ba奥斯哈兹gydF4y2Ba那gydF4y2BaOsCOIsgydF4y2Ba,gydF4y2Baosjars.gydF4y2Ba，受缺铁影响[gydF4y2Ba73.gydF4y2Ba］．在本研究中，我们发现这些基因包括gydF4y2Bagmjar1gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmCOI1gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmJAZgydF4y2Ba,gydF4y2BaGMMYC2gydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS下调了参与JA信号通路的JA含量，而在-Fe条件下，NaHS对根系JA含量没有影响(图2)。gydF4y2Ba7.gydF4y2Bag).在植物中，转录本丰度gydF4y2BabHLH38gydF4y2Ba和gydF4y2BabHLH39gydF4y2Ba在施用水杨酸（SA）之后，显着诱导，这表明SA与FE缺陷反应之间的紧密关系进行了紧密关系[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba那gydF4y2Ba74.gydF4y2Ba］．同样，我们的结果表明转录水平gydF4y2BaGmTGAgydF4y2Ba和gydF4y2BaGMPR-1gydF4y2Ba在-Fe条件下，NaHS下调了根系中SA信号通路的通路。在-Fe条件下，NaHS改变了游离SA和结合SA的含量(图2)。gydF4y2Ba7.gydF4y2Ba综上所述，缺铁反应受HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba通过调控大豆幼苗中植物激素的生物合成和信号转导相关基因的表达丰度，研究了大豆S信号转导和几种不同植物激素之间一系列复杂的相互作用。gydF4y2Ba

有机酸生物合成相关基因表达和有机酸含量受到H调节gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在缺铁gydF4y2Ba大豆gydF4y2Ba植物gydF4y2Ba

柠檬酸盐被认为是木质炎SAP中存在的羧酸盐之间最有可能的Fe转运主要候选者[gydF4y2Ba75.gydF4y2Ba］．此外，增加羧酸盐浓度，包括柠檬酸盐和苹果酸盐，以及在植物根组织中增强TCA循环相关转录物的表达，对于缓解Fe缺陷的反应是重要的[gydF4y2Ba76.gydF4y2Ba］．此外，三羧酸相关酶如柠檬酸合酶(CS)、苹果酸脱氢酶(MDH)和异柠檬酸脱氢酶(NADP)增加gydF4y2Ba^+gydF4y2Ba-IDH)已在缺铁的几种物种中观察到[gydF4y2Ba77.gydF4y2Ba］．然而，直到最近，文献中的信息很少有关H的效果gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS信号在有机酸代谢中的作用。例如，我们之前的研究表明HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS对铝诱导大麦根尖柠檬酸盐分泌的影响[gydF4y2Ba28gydF4y2Ba，暗示着HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS负责在某些压力条件下有机酸池的变化。在这项研究中，我们的结果清楚地表明，根据Fe缺乏，NaHs影响有机酸代谢（柠檬酸和苹果酸）和与TCA循环相关的基因转录水平gydF4y2BaGMCS.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGmACOgydF4y2Ba那gydF4y2BaGMMDH.gydF4y2Ba那gydF4y2BaGMMS.gydF4y2Ba在大豆的根部(图。gydF4y2Ba8.gydF4y2Ba）.在一项减轻硅的缺铁反应的研究中也发现了类似的结果[gydF4y2Ba76.gydF4y2Ba］．以上结果表明，HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS调控TCA相关基因表达和有机酸合成，进一步增强大豆植株对缺铁的适应能力。此外，关于HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS对大豆的Fe缺陷反应是稀缺的。最近对大豆研究的分析表明，大豆应该用作理解Fe缺乏耐受机制的新模型植物，发现一系列Fe缺陷调节有关相关基因[gydF4y2Ba42gydF4y2Ba］．我们的结果进一步证明了hgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS信号通过控制有机酸代谢以及参与大豆幼苗TCA循环的缺铁相关基因的转录激活，直接或间接地影响铁的获取和运输。gydF4y2Ba

基于以上结果和目前植物对缺铁反应机制的了解，HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba已经提高了大豆幼苗对Fe缺乏的适应。如图1所示。gydF4y2Ba9.gydF4y2Ba，本结果表明h的作用gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba通过调节FCR活性和铁稳态及硫代谢相关基因表达水平，增加质外体铁和根、叶铁积累，从而促进大豆幼苗的光合作用和生长。另外，外生HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaS通过调节缺铁大豆幼苗中植物激素相关基因的表达丰度来改变植物激素浓度。有机酸的生物合成和相关基因的表达也在HgydF4y2Ba_2gydF4y2Bas介导的大豆幼苗缺铁的缓解。gydF4y2Ba

植物材料和生长条件gydF4y2Ba

大豆种子(gydF4y2Ba大豆gydF4y2BaL.中华13）从河南农业科学院获得。将种子在75％乙醇中灭菌3分钟，然后在10％次氯酸钠溶液中另外10分钟，然后用蒸馏水洗涤并在土壤中发芽（Pindstrup Mosebrug A / S，丹麦）：蛭石（1：1）6天的混合物。幼苗（六天）被转移到塑料盆（每壶六个幼苗），它填充了1.5升营养溶液。营养液的组成如下：0.25mm kHgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba阿宝gydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba，0.5 mm mgsogydF4y2Ba_4.gydF4y2BaCa(NOgydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba）gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba， 1毫米KNOgydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba；微量元素组成为10 μM HgydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba博gydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba， 0.5 μΜ MnSOgydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba，0.5μμznsogydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba， 0.1 μΜ CuSOgydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba，0.1μm（nhgydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba）gydF4y2Ba_6.gydF4y2Ba莫gydF4y2Ba_7.gydF4y2BaO.gydF4y2Ba_24gydF4y2Ba．铁被提供为50μmfe（iii）-edta。植物在增长室（Thermo Scientific，Thermo Fisher，USA）的控制环境条件下生长，光/暗时期为14/10小时，相对湿度为70％，温度为21/26°C（夜/天）和280μmolm的光合活性辐射（par）gydF4y2Ba^{−2gydF4y2Ba}年代gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}．gydF4y2Ba

在用50μMFE（III）-EdTA供应的营养溶液中预先培养幼苗，然后以+ Fe（50μM）或-Fe（1μM）营养溶液（1μM）营养溶液在+ Fe（50μM）或没有供应100μMnaHs，-fe，1μmfe;−Fe + NaHS，用100 μM NaHS和1 μM Fe处理的幼苗;+Fe, 50 μM Fe;+Fe + NaHS, 100 μM NaHS和50 μM Fe处理幼苗。每次治疗都是由十二壶（每次重复的三个盆）组成。每次治疗都有四次重复。用Delta 320 pH电极（Mettler Toledo，瑞士）将营养溶液的pH调节至7.0，并完全再次更新每4d并连续充气。gydF4y2Ba

叶绿素测定gydF4y2Ba

叶绿素含量按Lichtenthaler方法测定[gydF4y2Ba78.gydF4y2Ba］．新鲜大豆叶（0.2g）用液氮粉末，使用四个80％（v / v）丙酮水溶液，直至观察到完全漂白。通过470,646和663nm的OD吸光度计算总叶绿素含量。gydF4y2Ba

铁含量分析gydF4y2Ba

对于总Fe含量分析，用1.5mm CaCl洗涤收获的根，茎和叶子三次gydF4y2Ba_{2，gydF4y2Ba}然后是一个gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba所以gydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba：H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaO.gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba（5：1）试剂混合物用于在消化嵌段中在420℃下消化植物样品。使用原子吸收分光光度计（Hitachi Z2000，日本，日本）测量总Fe浓度[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．gydF4y2Ba

根据Jin等人分析妊娠Fe含量。[gydF4y2Ba55gydF4y2Ba］．将根转移到含有150ml Aerated 0.5mm Caso的烧杯中gydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba15分钟。然后将根部放入填充150ml 1.5mm 2.2-双吡啶的管中。用n鼓泡溶液gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba12.5 mM Na加入前后5 mingydF4y2Ba_2gydF4y2BaS.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaO.gydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba取代氧气。最后，在520 nm波长下测定了Fe(II)-联吡啶配合物的分光光度。空白测量不需要样品。gydF4y2Ba

溶液pH测量gydF4y2Ba

营养液的pH值每3 d用Delta 320 pH电极(metttler Toledo, Zurich, Switzerland)测量一次。gydF4y2Ba

根系FCR活性测定gydF4y2Ba

根据Grusak的方法测定FCR活性[gydF4y2Ba79.gydF4y2Ba］．将整根置于填充有5ml测定溶液的试管中。测定溶液含有0.5毫米CASOgydF4y2Ba_4.gydF4y2Ba0.1 mM 4-形态线乙磺酸，0.1 mM bathophenanthroline- disodium salt hydrate (BPDS)， 100 mM Fe(III)-EDTA，用1 M NaOH调节检测溶液的pH至5.5。试管在25°C的暗室中放置1小时，用手旋转10分钟。用分光光度计在535 nm处测定测定液，测定Fe(III) [BPDS]的浓度。gydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba的消光系数为22.14 mMgydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}厘米gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}．这些数据被记录为相对根FCR活性的手段。gydF4y2Ba

内源性H的测定gydF4y2Ba_2gydF4y2BaS、谷胱甘肽和非蛋白硫醇含量gydF4y2Ba

内源性HgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba根据Sekiya等人描述的方法确定S含量。和陈等人。[gydF4y2Ba39gydF4y2Ba那gydF4y2Ba80gydF4y2Ba做了一些小的修改。还原谷胱甘肽含量由谷胱甘肽试剂试剂盒(中国南京建城生物工程研究所)根据Chen等人描述的方法测定。[gydF4y2Ba28gydF4y2Ba］．根据Del Longo等人分析非蛋白质硫醇（NPTS）的总含量。[gydF4y2Ba81.gydF4y2Ba]有一些修改。gydF4y2Ba

RNA提取、测序和文库构建gydF4y2Ba

用-Fe、-Fe + NaHS、+Fe和+Fe + NaHS处理15 d的大豆根样品进行RNA-Seq分析。转录组实验在北京诺金公司的协助下，按照Wang等人的方法进行[gydF4y2Ba82.gydF4y2Ba］．对于每种处理，将三种单独的根部汇集在一起​​，以产生一个混合样品，对RNA-SEQ分析中的每种治疗评估了三种生物重复。gydF4y2Ba

以每个样品总RNA量5 μg作为RNA样品制备的输入材料。所有样品的RIN值均在8.0以上。根据制造商的说明，使用Illumina TruSeq™RNA样品制备试剂盒(Illumina, San Diego, CA, USA)生成测序库。测序产生的原始图像数据通过base调用转换为序列数据，称为Raw data/ Raw reads，以fastq格式存储[gydF4y2Ba83.gydF4y2Ba］．同时计算干净数据的Q20、Q30、GC含量和序列重复水平。所有的下游分析都基于高质量的清洁数据。gydF4y2Ba

GO和KEGG通路gydF4y2Ba

根据Wang等人的方法，利用大豆基因组注释中的基因本体论(GO)对差异表达基因(DEGs)进行功能分类[gydF4y2Ba82.gydF4y2Ba］．经修正的GO术语gydF4y2BaP.gydF4y2Ba-值< 0.05被认为显著富集。gydF4y2Ba

KEGG是一个了解生物系统高级功能和效用的数据库资源。该路径主要是用于富集分析的公共路径相关数据库，如gydF4y2Bahttp://www.genome.jp.kegg/gydF4y2Ba．gydF4y2Ba

植物激素的测定gydF4y2Ba

根据制造商的说明使用激素提取试剂盒从样品中提取植物激素(科明生物技术有限公司)。、苏州、中国、gydF4y2Bawww.cominbio.com.gydF4y2Ba）.gydF4y2Ba

为了测定ABA，新鲜叶子和根组织(~ 100 mg)被密封在含有1 ml ABA标准提取缓冲试剂I的2ml试管中。将混合物在4°C中轻轻搅拌过夜，然后在8000 g离心10分钟。收集上相，加入0.5 ml试剂II进行三次萃取脱色。将水相调整到pH 2.8，与上层的有机相结合，然后用氮气鼓风机进行干燥。流动相为等体积0.5 ml，在样品瓶中过滤针滤器进行检测。每个样品10微升注入Kromasil C18反相柱(250 mm × 4.6 mm)，使用HPLC系统(Rigol L3000, Rigol, Beijing, China)进行分析。流动相为甲醇和1%乙酸水溶液。柱温30℃，流速0.8 ml/min。紫外检测波长为254 nm，进样时间为35 min。每个样品至少进行三个独立的生物学重复。gydF4y2Ba

ZA和GA的提取方法与ABA相同。每个样品10微升注入Kromasil C18反相柱(250 mm × 4.6 mm)，使用HPLC系统(Rigol L3000, Rigol, Beijing, China)进行分析。流动相为甲醇和1%乙酸水溶液。柱温30℃，流速1 ml/min，紫外检测波长254 nm，进样时间40 min。每个样品至少进行三个独立的生物学重复。gydF4y2Ba

对于IAA测定，提取方法与ABA相同。每个样品10微升注入Kromasil C18反相柱(250 mm × 4.6 mm)，使用HPLC系统(Rigol L3000, Rigol, Beijing, China)进行分析。流动相包括甲醇和超纯水（400mL：600mL）。柱温为30℃，流速为0.8ml / min，采样时间为40分钟。激发波长为275nm，发射波长为345nm。每个样品至少进行三个独立的生物学重复。gydF4y2Ba

JA的提取方法与ABA相同。每个样品10微升注入Kromasil C18反相柱(250 mm × 4.6 mm)，使用HPLC系统(Rigol L3000, Rigol, Beijing, China)进行分析。流动相为甲醇和0.1%甲酸水溶液。柱温35℃，流速0.8 ml/min，进样时间40 min。紫外波长为230 nm。每个样品至少进行三个独立的生物学重复。gydF4y2Ba

为了测定SA，将新鲜叶子和根组织(~ 100mg)用研浆研磨，加入1ml预冷试剂I，在4°C下提取过夜。离心8000 g 10 min，收集上清液，用0.5 ml试剂提取残渣2 h。取上清液，结合三次，40℃蒸发至无有机相，加入试剂II 20 μl，摇匀1 min。加入试剂III (1 ml)三次提取，将上有机相转移到新的EP管中，氮气干燥，并加入0.5 ml流动相进行溶解。样品用针状过滤器过滤。测试结果为free SA。然后在低水相中加入0.5 ml试剂IV，振荡1 h，再加入1 ml试剂III和0.5 ml流动相溶出。剩余结果为绑定SA。每个样品10微升注入Kromasil C18反相柱(250 mm × 4.6 mm)，使用HPLC系统(Rigol L3000, Rigol, Beijing, China)进行分析。流动相为1%乙酸水溶液和甲醇(40:60)。 The column temperature was 35 °C, the flow rate was 0.8 ml/min, and the sampling time was 40 min. The excitation wavelength was 294 nm, and the emission wavelength was 426 nm. At least three independent biological replicates of each sample were performed.

柠檬酸和苹果酸含量的测定gydF4y2Ba

新鲜的叶子和根用于测量柠檬酸和苹果酸内容物[gydF4y2Ba76.gydF4y2Ba］．样品(~ 100mg)立即在液态氮中冷冻gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba和彻底接地并用1ml甲醇萃取：去离子H.gydF4y2Ba_2gydF4y2BaO（3：1; v / v）混合物。在分析之前，用0.22μM-孔孔尼龙注射器过滤器（现象，托兰斯，CA）过滤所有样品。将提取物与甲醇（3：1; v / v）混合并使用HPLC系统（Agilent 1100，Agilent，SC，USA）分析，含有Kromasil C18反相柱（250mm×4.6mm）以分离柠檬酸来自不同样品的苹果酸。柱温，流速和取样时间分别为25℃，0.8ml / min和20分钟。阵列检测器设置为214nm。gydF4y2Ba

使用QRT-PCR验证mRNA-SEQ数据gydF4y2Ba

为了确认RNA-SEQ数据，使用QRT-PCR进行一些不同的键基因。根据Chen等人的方法，将总RNA与M-MLV逆转录酶（Takara，大连）的逆转录成第一链CDNA。（2011）。20μlQRT-PCR反应混合物包含以下：1μL正向和反向引物，包括铁稳态相关基因，硫代谢相关基因，植物激素相关基因和有机酸合成相关基因（表SgydF4y2Ba3.gydF4y2Ba)， 2 μl cDNA, 10 μl Faststart Universal SYBR Green Master (ROX, Mannheim, Germany)。利用PCR条件对这些基因的dsDNA合成进行扩增和检测，如表S所示gydF4y2Ba4.gydF4y2Ba．每个样本有三个独立的重复。使用比较阈值循环（CT）方法计算相对基因表达水平。gydF4y2Bagmeif1b和gmactingydF4y2Ba是内部控制。基因mRNA转录丰度值表示为2gydF4y2Ba^{——ΔΔCtgydF4y2Ba}[gydF4y2Ba84.gydF4y2Ba］．qRT-PCR使用QuantStudio™6 Flex系统(Life Technologies, Thermos, USA)进行。gydF4y2Ba

统计分析gydF4y2Ba

对于干重，使用根浴溶液的pH和叶绿素荧光参数，二十重复。对于生理和生物化学分析，进行至少三种重复。每个实验都包含三种生物重复。使用SPSS 13.0（SPSS Inc.，Chicago，IL）中的单向或双向ANOVA测试统计显着性，结果表示为平均值±SE。hoc比较使用Tukey测试进行了显着性水平的gydF4y2BaP.gydF4y2Ba< 0.05。gydF4y2Ba

我们的原始Illumina序列数据存放在国家生物技术信息中心（NCBI）中，并在序列读取归档（SRA）数据库中访问（gydF4y2Bahttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/sragydF4y2Ba）.登录号为PRJNA655258 (gydF4y2Bahttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/bioproject/PRJNA655258gydF4y2Ba），包括12项，包括12项（SAMN15731791-SAMN15731802）。本研究期间生成或分析的所有数据都包含在本发布的文章和补充信息文件中。gydF4y2Ba

与原:gydF4y2Ba

细胞分裂素gydF4y2Ba

GA：gydF4y2Ba

吉布林素gydF4y2Ba

阿坝:gydF4y2Ba

脱盐酸gydF4y2Ba

乙:gydF4y2Ba

乙烯gydF4y2Ba

BR:gydF4y2Ba

BrassinosteroidgydF4y2Ba

是:gydF4y2Ba

茉莉酸gydF4y2Ba

SA：gydF4y2Ba

水杨酸gydF4y2Ba

IRT1：gydF4y2Ba

铁调节器运输车gydF4y2Ba

FRO2:gydF4y2Ba

铁还原氧化酶2gydF4y2Ba

bHLH:gydF4y2Ba

基本螺旋环 - 螺旋蛋白gydF4y2Ba

Pn:gydF4y2Ba

光合作用gydF4y2Ba

WUE:gydF4y2Ba

水分利用效率gydF4y2Ba

圣:gydF4y2Ba

硫酸盐转运蛋白gydF4y2Ba

atp:gydF4y2Ba

ATP硫酸化酶gydF4y2Ba

APK:gydF4y2Ba

腺苷素硫酸盐激酶gydF4y2Ba

APR：gydF4y2Ba

Phosphoadenosine phosphosulphate还原酶gydF4y2Ba

先生：gydF4y2Ba

亚硫酸盐还原酶gydF4y2Ba

星期六：gydF4y2Ba

丝氨酸gydF4y2BaO.gydF4y2Ba- 乙酰转移酶gydF4y2Ba

OAS-TL：gydF4y2Ba

O.gydF4y2Ba-acetylserine(硫醇)裂合酶gydF4y2Ba

研究生院理事会:gydF4y2Ba

胱硫胺γ-合成酶gydF4y2Ba

CBL:gydF4y2Ba

胱硫醚beta-lyasegydF4y2Ba

大都会：gydF4y2Ba

甲硫氨酸合成酶gydF4y2Ba

我们致谢并感谢厦门大学海磊郑教授，为改善这份手稿提供了关键的建议和宝贵意见。gydF4y2Ba

本研究得到了中国（NSFC）的自然科学基金（31501822）和中国博士生科学基金（2015 M580876和2016 T90948）的财务支持，以及香港研究赠款理事会（14122415,14177617，AOE / M-05/12，AOE / M-403/16）。资助机构没有参与数据的研究，收集，分析和解释，以及写作稿件。gydF4y2Ba

从属关系gydF4y2Ba

1. 2 .西北农林科技大学黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室，陕西杨凌712100gydF4y2Ba

   陈娟，张妮娜，潘青，林学元，上官周平，魏葛红gydF4y2Ba

2. 香港中文大学生命科学学院暨农业生物技术国家重点实验室，香港沙田gydF4y2Ba

   陈娟，张建华gydF4y2Ba

3. 香港浸会大学生物学系，香港九龙塘gydF4y2Ba

   建华张gydF4y2Ba

贡献gydF4y2Ba

JC完成了所有的实验，分析了数据并撰写了手稿。NNZ、QP、XYL协助实验。ZPSG和JHZ帮助修改稿件。JC和GHW策划和设计了研究，撰写和修改了手稿。值得一提的是，所有的作者都阅读并批准了手稿。gydF4y2Ba

相应的作者gydF4y2Ba

对应到gydF4y2Ba陈胡安gydF4y2Ba或gydF4y2BaGe-Hong WeigydF4y2Ba．gydF4y2Ba

伦理批准和同意参与gydF4y2Ba

不适用。gydF4y2Ba

同意出版物gydF4y2Ba

不适用。gydF4y2Ba

相互竞争的利益gydF4y2Ba

作者声明，在没有任何可能被解释为潜在利益冲突的商业或财务关系的情况下进行了这项研究。所有作者宣布他们没有竞争利益。gydF4y2Ba

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Springer Nature在发表地图和机构附属机构中的司法管辖权索赔方面仍然是中立的。gydF4y2Ba

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