图5

比较7、14和21 dpi时MDMV OH5结构的插入稳定性。以pWX27、pWX68和pWX56侵染的植物为材料，采用RT-PCR方法对插入位点两侧的引物进行插入序列的完整性检测。每个复制包括5株接种野生型病毒pWX6的植株。对于每个样本，扩增子在5个类别中得分(来自pWX70的例子如面板C所示);作为全长插入一个，全长插入加上较小的波段检测b，多个带没有完整长度插入c，小于全长的单带插入通常接近野生型病毒扩增子d，没有检测到波段e与质粒对照pWX70、pWX27和pWX6 (WT)相比。按类别评分的频带的样本数量一个和d(分别为A组和B组)对每个构造进行统计比较。在固定的评估时间，标记为“ns”的结构物与pWX27 GFP在P≤0.05，带*的构型与pWX27 GFP在P根据arcsin -平方根尺度上最小二乘均值的两两比较，≤0.05。采用WX112/WX111 (pWX27)引物对7、14和21 dpi的幼嫩叶片进行RT-PCR分析;WX317 / WX315 (pWX68);引物WX358/WX367插入GFP (pWX56)，引物WX317/WX315插入VIGS (pWX56)。图C所示的样本样本来自14 dpi接种pWX70;L = GeneRuler 100 bp + DNA梯子(ThermoFisher Scientific, USA)