图1

CRISPR/Cas9二进制向量的物理映射和结构。(一)pGreen和pCAMBIA骨架的物理图，CRISPR/Cas9二进制载体的来源。pGreen增殖所需的辅助质粒图谱农杆菌属和变异Bsa表明在pCAMBIA骨架上的I位点。LB/RB, T-DNA左/右边界;pSa-ori，用于复制农杆菌属用相应的复制蛋白(pSa-repA)进行工程;KmR，卡那霉素抗性基因;中复制所需的复制原点大肠杆菌；pVS1-staA、pVS1-ori和pVS1-rep是细胞内复制所需的DNA元件农杆菌属．只留下LB和RB之间的225-bp片段，用于比较pGreen和pCAMBIA骨干的大小。(B, C)RB和LB之间的区域的物理图。T-DNA区域的大小和sprr -gRNA- sc和最终工作的gRNA的结构被指出。zCas9，玉米codon-optimizedCas9；U6-26p,拟南芥U6基因启动子;U6-26t,U6-26带有下游序列的终止器;OsU3p、大米U3启动子;OsU3t、大米U3带有下游序列的终止器;SpR，大观霉素抗性基因;gRNA-Sc gRNA脚手架。