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真空蔗糖转运蛋白,HBsut5的表征Hevea Brasiliensis.:通过调节树皮和乳草剂的细胞内蔗糖输送来参与乳胶生产
BMC植物生物学体积19, 文章编号:591(2019年)
抽象的
背景
蔗糖(Suc)作为橡胶生物合成的前体分子Hevea Brasiliensis.,通过Phloem介导的叶片介导的长距离运输到躯干树皮中的乳脂矿,其中乳胶(乳花素的细胞质)被擦除橡胶。在我们之前的报告中,六个Suc运输商(SUT)基因已在HEVEA树中克隆,其中HbSUT3被验证以在Suc加载到拟材料中发挥积极作用。在这项研究中,另一个乳胶丰满的SUT同种型,HbSUT5,只有次于HbSUT3对其在乳胶生产中的作用进行了研究。
结果
系统发育分析和亚细胞定位均在Sut4-CLADE(= III型)下鉴定HBsut5作为液体局部局部化的蛋白质。Baker酵母中的Suc摄取测定显示HBsut5是典型的Suc-H+对称者,但其对Suc(pH 5.5的KM = 2.03mm)的高亲和力以及运输Suc和麦芽糖的相似效率使其成为Sut4-Clade下的特殊SUT。在转录物水平上,HBsut5大量并优先在HEVEA Barks中表达。成绩单HbSUT5在橡胶树胶乳和树皮中,通过敲胶和乙烯利(与HbSUT3相反)两种刺激产量的处理均显著降低。在乙烯利处理下,胶乳胞浆中Suc含量显著降低,而胶乳中lutoids(多分散液泡)含量变化不大,说明其作用降低HbSUT5表达在Lutoids中的成功级化,从而提高含型器中的成功沉积强度。
结论
我们的发现提供了一个液泡蔗糖转运体,HbSUT5,在生成橡胶乳汁管的滑石和胞质交换中的作用。
背景
天然橡胶 (独联体-聚异戊二烯)是一种重要的工业原料,其商业来源仅来自一种热带树种,Hevea Brasiliensis.(para橡胶树)。与所有植物一样,橡胶树叶片中产生的光合碳水化合物是其生长和代谢所必需的能量来源。蔗糖(Suc)是光合碳水化合物从叶片向外周组织的主要运输形式[1],并在特化韧皮部产胶乳汁管的细胞质(乳胶)中作为橡胶生物合成的底物[2,3.].Suc向不同水槽的转运由Suc转运体(SUTs)介导[4,5,6,7],这是具有12个跨膜跨越域的膜蛋白[8,9].sut通常分为5个枝(SUT1 ~ 5)或3个类型(I ~ III;类型I = SUT1枝,类型II = SUT2, SUT3和SUT5枝,类型III = SUT4枝),通过特定的生理特征和功能[6,7,10,11,12,13].
在经常利用的橡胶树中,躯干吠声中的含型器代表一个主要的成功水槽,并且在某些情况下,乳胶的Suc浓度与橡胶产量正相关[14,15,16,17,18].sut1分支成员的重要作用,HbSUT3(代名词:hbsut1b.)以前证明,在成功加载到含硅层,并以橡胶生产率为由[19,20.].为了加深我们对Suc在产胶乳汁管中装载、运输和储存的调控网络的理解,有必要对其进行表征HbSUTs在这些细胞中表达。在Hevea树的乳胶中,表达了Sut4-Clade成员,Hbsut5,只是低于HbSUT3在六个中SUT.基因[19,21].大多数植物物种似乎只有一个Sut4成员,近年来他们的生理角色引起了很多关注。有趣的是,大多数迄今为止迄今为止的Sut4思工构件已被分配给真空膜(TONOPLAST),在真空中调节成功,运输和储存网络[22,23,24,25,26].在橡胶树的乳汁管中,类叶体作为液泡的多分散系统,占乳胶体积的近20%,在控制抽胶后乳胶流动时间方面起着关键作用,从而影响乳胶产量[27].Lutoids也被认为具有储存和解毒的功能,并具有溶酶体和渗透作用。因此,研究潜在的lutooid膜定位SUT成员HbSUT5的生理作用是很有意义的。本研究通过亚细胞定位法研究HbSUT5的功能,在足底在不同条件下的表达量,以及酵母中Suc的吸收动力学,以确定在乳胶生产中可能的生理作用。
结果
亚细胞的识别HbSUT5
的H. Brasiliensis Sut.(HBsut.)基因,HbSUT5,已克隆[19,21]但还没有进一步表征。HbSUT5含有1497-BP-LONG ORF,其预测498个氨基酸的蛋白质,具有54.1kDa和pi的理论分子量为9.39。系统发育分析(图。1a)透露Hbsut5与另一个Hevea树Sut Hbsut4一起属于Sut4 Clade Suts。如TMHMM方法所预测的(http://www.cbs.dtu.dk/services/tmmm/)[28, HbSUT5由12个跨膜跨,短的胞质N端和c端,跨膜跨6和跨7间有一个短的中央胞质环组成,这些特征是典型的SUT4分支SUT成员(附加文件2:图S1) [5].为了进一步验证HbSUT5的亚细胞位置,将与GFP(绿色荧光蛋白)融合的HbSUT5蛋白与已知的水稻液泡内固有蛋白OsTIP1;1与RFP(红色荧光蛋白)融合的HbSUT5蛋白瞬时表达于水稻原生质体中[29].GFP信号与RFP信号完全重叠(图。1B-E),表明HBsut5与良好表征的Tonoplast蛋白ostip1共享类似的亚细胞位置; 1。高严格DNA凝胶印迹分析表明,在不同的限制分析下存在一至三个杂交带,表明HbSUT5是HEVEA基因组中的单个或低拷贝基因(图。1F),其结果已被我们高质量的橡胶树基因组草图进一步验证[30.].
功能分析HbSUT5在面包师的酵母中
测试HBsut5是否具有成功运输活动,用贝克酵母细胞表达HbSUT5使用放射性标记进行cDNA14c-suc。成功转移到表达的酵母细胞中HbSUT5在实验时间(2 ~ 10分钟)内,发现其几乎是线性的,在10分钟后,达到含有空载体pDR196的对照酵母的约13倍(图3)。2一种)。这些结果表明HbSUT5编码功能的Suc传输器。
Suc运输动力学分析显示HBsut5的运输活性显然依赖于缓冲溶液的pH,显示在5.0周围的最高,但随着缓冲液pH的升高而逐渐减小(图。2b)。HBsut5的Suc患者在pH 5.5下在0.5-8mm的SuC基板范围内测量,并且使用数据来进行迈克利斯 - MENTen分析(图。2C)。数据的EADIE-Hofstee双倒数图(图。2d)显示,估计的Km为2.03 mM,运输速率Vmax为0.522 Suc min−1(10.8细胞)−1,提示HbSUT5属于高亲和性/低容量(HALC) Suc转运体[31].
用几种未标记的糖检测HBsut5的底物特异性14C-SUC竞争对手,包括半乳糖,果糖,肌醇,乳糖,SUC,麦芽糖和棉糖。结果表明,只有成功和麦芽糖可以在类似的范围内显着竞争14C-Suc吸收(表1),表明HbSUT5在糖运输中的相对底物特异性。此外,果糖、肌醇和乳糖对Suc的吸收有一定的促进作用。此外,羰基氰化物的质子载体强烈抑制了HbSUT5对Suc的转运米-氯苯腙(CCCP)和二硝基苯酚(DNP)(表1).这一结果与ph值依赖的Suc运输能力的特性(图。2b)清楚地表明hbsut5是hbsut5+往下同向转运。
在Planta.表达式模式HbSUT5
正如之前报道的,在这六人中HBsut.的基因,HbSUT5在乳胶中大量表达,只不到HbSUT3,并表现出比其他Sut4-Clade Sut基因更高的表达,HbSUT4[19].除了是一个丰富的SUT.在乳胶中的同种型,HbSUT5是树皮中的主要亚型(图。3.a),预测该基因的多官能角色。抄本丰富HbSUT5采用定量聚合酶链反应(QPCR)对橡胶树叶片、胶乳、种子、花和树皮5个组织进行比较。如图所示。3.B,HbSUT5在树皮和种子中最高度表达,其次是乳胶和叶子,以及花中最低的。
增加成功载荷是含乙烯刺激乳胶生产的最重要机制之一[19,32,33].进一步研究的功能HbSUT5通过QPCR分析乙烯利(2-氯乙基膦酸)树皮处理后其在胶乳和树皮组织中的表达模式。HbSUT5在乳胶和树皮组织中表达均显著下调,在处理24小时后,其在乳胶中的表达量约为初始水平的40%,在树皮中的表达量约为初始水平的15%。4一种)。为了进一步探测乙烯治疗下的HBsut5表达降低的作用,在胶乳细胞溶溶胶(C-血清)和Lutoids(B-血清)中检查SuC内容物。结果表明,通过治疗显着降低C-血清,但B-血清Suc的影响远低得多,表明降低的HBsut5表达在减少含有Lutoids的Suc突变时(图。4b).采伐未采伐的橡胶树(以前从未采伐过)是识别和表征乳胶再生相关基因的理想模型,因为采伐对最初几次采伐的乳胶生产具有显著的刺激作用[19,34].如图所示。3.C,表示HbSUT5在连续的四次敲胶后,胶乳产量显著降低,达到低于初始水平的4%,此后保持在较低水平,这种模式与敲胶后胶乳产量的显著增加负相关[19].刺激产生乳胶的树皮创伤[35还发现减少了HbSUT5表达(图。3.d),治疗后24小时达到最低水平。减少了HbSUT5通过点击的乳胶中的表达被假设以在埃塞勒治疗下的情况下以类似的机制起作用。
表征HbSUT5启动子
目的:探讨HbSUT5,其推定的启动子序列从其起始密码子(Genbank:Ku529197)上游的约1.5kb长的基因组序列[36]通过硅质分析和非均匀瞬态表达进行表征。NNPP(神经网络启动子预测)启动子预测器(http://www.fruitfly.org/seq_tools/promoter.html),该序列含有高分(0.99)转录启动子,具有推定的转录开始部位(标记为C.+ 1)位于起始密码子(ATG)的上游342bp(图。5一种)。地点(植物顺式作用调控DNA元素)软件(http://www.dna.affrc.go.jp/place/),然后用来分析假定的独联体- 由启动子瘫痪的元素。总共预测了54个不同的顺式调节元件,其中许多涉及多种生物学过程,包括应激和激素响应,信号传导途径和组织,器官或代谢特异性表达(图。5一种;附加文件1:表S1)。4个TATA box和21个CAAT box motif等多个最小元素的存在表明其能够在大多数植物中启动准确的基础转录。实验中,通过瞬时启动子表达分析证实了其启动子的活性,结果表明,在GFP表达盒驱动下,烟草原生质体中出现了强烈的GFP荧光HbSUT5启动子(pSUT5-GFP)(图。5b)。
值得注意的是,预测了三种经典乙烯响应元件(ERES)HbSUT5启动子,一个( - 785)的感测定向,另一个( - 767和327)的反义方向。除此之外,还有9个CIS作用元素,其中有十多个地点HbSUT5启动子,其中涉及脱水反应(MYB (myeloblastosis)和MYC (myelocytomatosis)识别位点)37,38]、组织或器官特异性表达(E-Box“CANNTG”、POLLEN1元素“AGAAA”和四核苷“YACT”)[39,40,41.],整体表达激活(ct富基motif“TCTCTCTCT”,GATA-Box和ARR1识别位点“NGATT”)[42.,43.,44.]和糖代谢(DOF核心识别位点“AAAG”)[45.].
讨论
在高等植物中,光合碳水化合物的运输、分配和积累是生长发育过程中必不可少的重要生化过程。光合碳同化物主要以Suc的形式通过韧皮部装载、长途运输和卸载到不同的汇[46.].Suc转运体(SUTs)已被证实积极参与这些过程,因此在碳水化合物分配中发挥重要的生理作用,调节植物生长发育的所有已知阶段[47.,48.,49.].
在这项研究中,一个h .取代巴西橡胶树Sut4-Clade(= III型)SUT成员,HbSUT5,通过亚细胞定位研究、succ摄取测定(图。2和表格1)和一些在足底在几种乳胶刺激处理下的表达分析(图。3.和4C,D)。的HbSUT5有12个跨膜跨越域(附加文件2:图S1),显示GPH(糖苷 - 戊苷-己酮糖苷e)阳离子交易者家庭在主要促进者超家族中的典型结构特征[9].系统发育(图。1a)和亚细胞定位研究(图。1抵扣)进一步确定HbSUT5作为仪表素局部的Sut4-Clade Suts。Sut4-Clade Suts通常对SUC具有较低的亲和力,属于低亲和力/高容量运输车[23,50.,51.,52.,53.].如Suc传递测定透露(图。2),HbSUT5是典型的such - h+大多数其他sut4 -进化支SUTs [23].然而,HbSUT5对Suc具有较高的亲和力(Km = 2.03 mM, pH 5.5),其特征与高等植物中大多数以低亲和力催化Suc吸收的sut4分支SUT成员不同[7].据报道的唯一其他Sut4-Clade Sut具有高同伴性来自胡萝卜,DCSut1 [54.].与无所不在的组织表达相反HbSUT5(图。3.a,b),表达DCSUT1在胡萝卜植物的绿色部分中受到限制,在Phloem suc加载中运作[54.].除了成功和麦芽糖外,Sut4-Clade Suts还可以运输多种葡糖苷,而不是Sut2-Clade Suts,但更具体地比Sut1-Clade Suts [6].例如,SUT4-CLADE SUT来自莲花japonicus.LJSut4对包括Suc,Salicin,Helicon,麦芽糖,蔗糖和α-和β-连接的合成苯基愈合甙的葡糖苷具有宽的底物特异性[23].在检测的7种单糖、二糖或三糖中,HbSUT5只能有效地运输Suc和麦芽糖(见表)1).HbSUT5的底物是否还包括一些由LjSUT4和其他sut4分支SUTs运输的糖苷尚待确定[6].值得注意的是,Hbsut5随着Suc(表1)而有效地运输麦芽糖,并且已发现所有其他特征的Suts比麦芽糖更有效地运输成功[6].
在成熟的植物细胞中,中央液泡占细胞体积的80 - 90%,是离子、糖和大量其他代谢物的蓄水池,以调节细胞压力、解毒和生态相互作用[55.,56.,57.].在胶乳乳汁管中,液泡出现在多分散溶酶体液泡中,即具有储存功能的乳状体,占新鲜乳胶体积的10 - 20%(主要是乳汁细胞质)[58.].近年来,已经证明了调色剂局部的Suts在将Suc运输到细胞质中,在将Suc运输到细胞质中发挥着调节作用,并且在植物生长和发展的多个方面的作用[23,24,59.].在莲花japonicus., LjSUT4主要在根和结节中表达,其表达与结瘤过程呈正相关[26,59.,60.].在拟南芥,AtSUT4在库组织中表达水平较高,在蔗糖诱导的种子萌发抑制中发挥作用[61.].使用RNA干扰(RNAi)杨树, PtaSUT4在横向和末端汇调控Suc的输出和利用,并在调节全植物水分关系、水分胁迫响应和光合作用中发挥重要作用[25,52.].抑制StSUT4RNAi的表达导致转基因马铃薯植物中的块茎产量和早期开花,其表达也被吉伯塞林和埃塞勒诱导[62.].
在HEVEA树中,含羞草中的乳胶再生利用SUC作为橡胶生物合成的前体分子,这代表了高碳成本活性[58.].因此,含型乳渣的增强和分解代谢的效率对于橡胶生产率至关重要[14,35].现在清楚,这些过程主要由Suc Transporter Hbsut3控制[19和中性/碱性转化酶HbNIN2 [63.),分别。敲胶对原始橡胶树的乳胶产量有刺激作用,在最初的7到10次敲胶过程中,乳胶产量显著增加[19].两者的表达HbSUT3[19),HBNIN2.[63.通过在乳胶中敲击,表明增强的Suc摄取和分解代谢有助于乳胶再生的显着上调。相反,调色剂的表达式HbSUT5在前四个触头期间在胶乳中迅速下降,然后之后保留低水平(图。3.C)。我们假设抑郁症HbSUT5表达有助于从两个方面进行刺激刺激的乳胶生产。第一,下调HbSUT5表达可能导致从Lutoids进出含量降至细胞溶胶,从而提高已经受到乳胶中活化的Suc分解代谢刺激的(Suc)沉积强度。其次,在含有Lutoids中挖掘增强的成功分区化,这可能有利于含有Lutoids的完整性,从而有益于乳胶流动的持续时间[27].在定期轻拍的Hevea树上,Ethephon Bark治疗增加了乳胶生产,尽管与攻丝对维尔京橡胶树的影响相比,但在较小程度上58.].HbSUT5表达受到乙烯治疗的下调,虽然不像攻丝处理一样致力于(图。3.e),这可能有助于在类似机制中产生乳胶生产。通过在乙烯治疗下检查乳胶及其细胞溶胶和含有Lutoids的Suc水平来证明该假设。乳胶中的成果水平的显着降低[19它的胞质醇(图。4b)强调lutoids Suc变化不明显。的降低HbSUT5表达可以起到减少来自Lutoids的Suc导出。有趣的是,表达HbSUT5,主干树皮显性SUT亚型(图。3.a和b),在躯干吠肠中的埃塞弗治疗也显着下调。这种调节在含羞草外的成功浓度影响的方式中仍有待确定,因此是含型乳草的含量。分析HbSUT5启动子表明存在响应于各种应力的多个顺式作用元件(图。5一种)。这是显着的HbSUT5启动子Harbors十多个脱水响应式顺式作用元件的位置(图。5A),可能解释了敲击的显著效果HbSUT5表达式。摘胶是乳胶收获的过程,其结果是产生橡胶的乳汁管受到脱水胁迫,各种功能基因的表达响应有助于收获调节的乳胶再生[64.].除此之外,启动子中还存在几个乙烯和赤霉素反应元件,说明参与了HbSUT5在乙烯和吉布林素途径中与马铃薯同源物相似,StSUT4[62.].
结论
在这项研究中,我们分析了另一个Suc转运基因,HbSUT5,在橡胶树。HbSUT5是一个液泡型Suc转运体,属于sut4分支(= III型),对Suc具有较高的亲和力。HbSUT5是树皮显性SUT亚型,但也大量表达于乳胶(乳汁管的细胞质)。与乳胶优势异构体相反,HbSUT3,HbSUT5抽丝和乙烯利处理明显降低表达量,表明对两种产量刺激均呈负性反应。结合乳胶中Suc含量及其胞质和液泡(多分散液泡)的结果,认为HbSUT5在乳汁管中lutoids与胞质交换中起作用,从而与HbSUT3一起影响橡胶树中橡胶产量的形成。
方法
植物材料
Reyan7-33-97(同义词:Catas7-33-97或RY7-33-97)橡胶树(h .取代巴西橡胶树)为海南省橡胶树栽培品种,由中国热带农业科学院(CATAS)试验园提供。选择的树木在S/ 2d /3系统下敲击(半螺旋模式,每3天)。从热颜7 - 33-97中采集花、叶、乳胶、种子和树皮5个组织,用两年的时间进行RNA提取。同一类型的树木也被用来处理乙烯利.选取8年成熟的未抽穗处女树,进行抽穗伤处理。
乙烯,伤口和攻丝处理
对于乙烯和伤口处理,选择四批六十棵树以检测表达模式Hbsut5,每批批次都有三种生物重复.在乙烯处理中,1批用1%羧甲基纤维素(CMC)作为对照,其余3批用1%乙烯利(2-氯乙基磷酸,一种乙烯释放剂)在1% CMC中处理,处理时间分别为出丝前12、24和48 h。分别在攻丝前2、12、24 h用图钉刺伤3批,第4批未刺伤作为对照。根据采伐处理,将15株未采伐的树木分为3个生物复制,进行前8次采伐。所有处理过的树木同时被敲开,收集乳胶和树皮进行RNA分离。乙烯、伤害和抽丝处理及样本收集的细节如前所述[19].除此之外,还使用促蒽酮方法在乙烯治疗后在乳胶(C-血清)和Lutoid(B-血清)的胶乳中测量蔗糖含量[19].
RNA分离,cDNA合成和QCR
用DNase I(Takara,China)提取并用DNA酶(Takara,中国)进行含量的RNA,并通过如前所述的纳米二维(Thermo,USA)进行浓度和质量[65.].使用PrimeScript™II第一链cDNA Synthesis Kit (TaKaRa,中国)按照制造商的协议进行cDNA合成。引物对HbSUT5(5'-AgTtgCTGGataGctagagaga-3'和5'-cggtggtctagccctg-3')用于分析表达式模式,和yls8.(有丝分裂蛋白)作为归一化的内部对照基因[66.].QPCR通过CFX96触摸实时PCR(BIO-RAD,USA)操作,使用Sybr®MifixEx™II(完美实时)(Takara,China)。PCR反应系统,程序和数据分析是如前研究的[19].
南方和反向北部印迹
使用CTAB DNA提取方法从成熟叶中提取REYAN7-33-97的基因组DNA。基于cDNA和基因组序列设计了一对引物(感觉底漆:5'-aacaaaaagaaacagttgctggatg-3'和反向引物:5'-cctgagtcatgttttattagcc-3')HbSUT5,并用于扩增全长530-bp的无内含子片段,该片段不含酶切位点BCU.我,XBA.我,BspT我和BCL.I.扩增的片段是用随机引物DNA标记试剂盒(Takara,中国)标记的石叉蛋白标记,并用作随后的Southern印迹分析中的探针。10μg基因组DNA被消化BCU.我,XBA.我,BspT我和BCL.我隔夜了。将消化的产物在0.8%琼脂糖凝胶上分离,并转移到杂合 - N +膜(Amersham Pharmacia,USA)上。根据详细说明进行Southern印迹分析的协议[67.].采用反向Northern杂交技术分析这6种基因的相对转录本丰度HBsut.如前所述的树皮中的基因[19].
亚细胞定位
对于亚细胞定位分析,HbSUT5sub-cloned了BsaI位点进入pBWA(v)HS-gfp载体,产生HbSUT5-GFP融合。编码液泡膜固有蛋白的基因,ostip1; 1,被亚克隆Bsa我网站进入PBWD(LB)-MKATE向量以产生OSTIP1; 1-RFP融合。使用的特定引物对为5'-cagtgtctcacaacatggcaatcccacaggcgga-3'和5'-cagtggtctcatacatggggggcatggggggcttt-3'(HbSUT5)和5'-cagtggtctcacaAcatgccgatccgcaacatcgc-3'和5'-cagtggtctcatacagtagtcggtggtgggggggagct-3(ostip1; 1).在瞬时表达分析中使用叶片在30℃下在30℃下在30℃下培养的叶子的原生质体在瞬时表达分析中进行7至15天。具有不同标签信号,HBsut5和Ostip1; 1的两个基因根据Yu等人将其共转化为原生质体。[68.].用激光扫描共聚焦显微镜(Olympus FV1000, japan)观察转化原生质体。GFP的激发波长和发射波长分别为480和510 nm, RFP的激发波长和发射波长分别为588和635 nm。
酵母中Suc吸收试验
要了解Suc运输的特点,HBsut5的扩增产物被切割SMA.我和萨尔我并克隆到酵母表达载体pdr196中,使用5'-gagcccgggatggdcaatcccacag-3'和5'-gaacgtcgactcatggggggca-3'的对引物(下划线序列SMA.我和萨尔我承认网站)。然后将构建的载体转化为面包酵母(酿酒酵母)菌株SEY621014C-Suc吸收分析根据参考文献[19,69.].采用SAS(统计分析系统)对数据进行统计分析。
分析对HbSUT5启动子
的HbSUT5启动子,5'-上游区域的近似1.5kb片段HbSUT5基因,已经被分离出来[36],并使用PLACE软件预测其顺式作用元素(www.dna.affrc.go.jp/htdocs/place/).的HbSUT5使用5'-CgacGGCCCGGGGCGCGGTA-3'和5'-TCCCTTTCTCCTCGAAAGAACAC-3'的基因特异性引物扩增,并插入PXGFP-P的瞬时表达载体,该PXGFP-P的报告基因GFP为瞬态启动子表达分析[70].命名为psut5-gfp的所得构建体,用烟草原生质体转化为农杆菌属共聚焦激光扫描显微镜(Olympus FV1000, japan)对转化24 h后的GFP荧光信号进行扫描检测。烟草原生质体制备的详细资料,农杆菌属-介导转化和荧光信号扫描,如前所述[71.,72.].
可用性数据和材料
本研究期间生成或分析的所有数据都包含在本发布的文章及其补充信息文件中。作者很高兴根据要求分享数据。
改变历史
18年1月2021年
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缩写
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羰基氰化物M-氯苯基腙的主菌
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羧基甲基纤维素
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二硝苯酚
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乙烯反应性元素
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绿色荧光蛋白
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糖苷 - 戊苷 - 己酮糖苷
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高亲和力/低容量
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中性/碱性转化酶
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成髓细胞瘤
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Myelocytomatosis
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神经网络启动子预测
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植物顺式作用的调控DNA元件
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定量聚合酶链反应
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红色荧光蛋白
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RNA干扰
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蔗糖
- SUT:
-
往下运输
- 小费:
-
Tonoplast内在蛋白质
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确认
我们感谢秦云霞博士对本次研究提出的宝贵意见和建议。我们也感谢肖小虎博士和黄亚成博士的技术支持。
资金
本研究得到了海南省的自然科学基金(2017×CXTD019),中国国家自然科学基金(No.31825007,31770709),中央公共利益科学机构基础研究基金的创新研究团队课程热带农业科学院(17CXTD-28),中央公共利益科学机构基础研究基金 - 中国热带农业科学院(No.1630022018019,1630022017003,1630022017005)和中国国家重点研发计划(2018YFD1000502).资金组织支付了这项研究的费用(实验成本和出版费用),但没有参与数据的设计和收集,分析和对数据的解释和撰写手稿的诠释。
作者信息
隶属关系
贡献
CRT和XYL构思了该研究,并设计了实验。HPL,JHY,LSX,YJF,BH和DBH执行了实验工作并进行了数据分析。Crt和Xyl写了稿件。所有作者都阅读,编辑并批准了最终手稿。
相应的作者
道德声明
伦理批准和同意参与
我们的研究没有使用转基因技术,所有材料均来自CATAS(中国热带农业科学院,中国海南儋州)试验园。
同意出版物
不适用。
利益争夺
提交人声明他们没有竞争利益。
额外的信息
出版商的注意事项
施普林格《自然》杂志对已出版的地图和机构附属机构的管辖权要求保持中立。
补充信息
附加文件1:表S1。
通过使用Place软件预测HBsut5启动子的推定顺式调节元件
附加文件2:图S1
.HbSUT5跨膜跨度的预测。使用TMHMM方法进行预测(Krogh et al., 2001)
权利和权限
开放获取本文遵循知识共享署名4.0国际许可协议(http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/)如果您向原始作者和源给出适当的信用,则允许在任何介质中进行不受限制的使用,分发和再现,提供指向Creative Commons许可证的链接,并指示是否进行了更改。Creative Commons公共领域奉献豁免(http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/)适用于本条提供的数据,除非另有说明。
关于这篇文章
引用这篇文章
Long,X.,Li,H.,Yang,J.et al。真空蔗糖转运蛋白,HBsut5的表征Hevea Brasiliensis.:通过调节树皮和乳汁管细胞内蔗糖的运输参与乳胶的生产。BMC植物BIOL.19,591(2019)。https://doi.org/10.1186/s12870-019-2209-9
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关键字
- 蔗糖转运蛋白
- 乳草
- 液泡
- 乳胶生产
- 橡胶树