结合的应用GydF4y2Ba褐藻GydF4y2Ba提取物和壳聚糖协同激活豌豆对白粉病的宿主防御GydF4y2Ba

背景GydF4y2Ba

白粉病是影响豌豆产量的重要病害。GydF4y2Ba褐藻GydF4y2Ba摘要壳聚糖(CHT)和提取物(ANE)是一种用于改善植物健康的生物刺激素。分别评价了单用和联用对豌豆白粉病的防治效果。GydF4y2Ba

结果GydF4y2Ba

ANE和CHT的组合应用对病原体发展一个显著抑制作用，它与对照相比（90.5％）疾病的严重程度降低到35％。ANE和CHT的组合增强植物防御酶的活性;苯丙氨酸氨裂解酶（PAL），过氧化物酶（PO），并产生活性氧（ROS）和过氧化氢的（HGydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba）.此外，该处理增加了茉莉酸(jasmonic acid, JA)信号通路中许多植物防御基因的表达GydF4y2Balox1.GydF4y2Ba和GydF4y2Ba细胞色素氧化酶GydF4y2Ba和水杨酸（SA）介导的信号传导途径，如GydF4y2BaNPR1.GydF4y2Ba和GydF4y2BaPR1GydF4y2Ba．其他涉及防御机制的基因，比如GydF4y2BaNADPH氧化酶GydF4y2Ba和GydF4y2BaC4HGydF4y2Ba联合治疗也上调了吗GydF4y2Ba．GydF4y2Ba

结论GydF4y2Ba

ANE和CHT的组合主要通过调节JA和SA介导的信号通路来抑制豌豆粉状霉菌。GydF4y2Ba

白粉病豌豆（PM）（GydF4y2BaPisum一GydF4y2Ba是由专性寄生真菌引起的GydF4y2Ba白粉菌属pisiGydF4y2Ba．粉末状霉菌感染了豌豆植物的所有上面部分，这会对生产力产生显着的负面影响，包括减少豆荚和种子的数量[GydF4y2Ba1GydF4y2Ba该疾病被报道引起25-50％的产率损失[GydF4y2Ba2GydF4y2Ba那GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba］．GydF4y2BaErisyphe皮丝GydF4y2Ba通过生产子囊孢子和分生孢子[传播的GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba］．在豌豆植物上，分枝瘤和囊孢子均发芽，在表面和感染表皮上发育映异性[GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

杀虫剂的广泛使用已经导致耐药性的一些常见的病原体，以及有益微生物和动物的损失的发展。此外，还有无农药食品当中挑剔的消费者的需求不断增加，需要环保型的植物保护实践的发展。利用在农业海藻衍生产品已在近几年稳步增长。GydF4y2Ba褐藻GydF4y2Ba是在北大西洋和欧洲西北海岸发现的一种潮间带褐藻[GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba］．GydF4y2BaA. Nodosum.GydF4y2Ba生物质被用来生产一种最常被研究的基于海藻的生物刺激素[GydF4y2Ba8.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba10GydF4y2Ba］．据报道，棕色海藻的商业萃取物可以促进植物生长，促进有益土壤微生物的生长，并诱导植物对生物和非生物胁迫的抗性[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba11GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba褐藻GydF4y2Ba据报道，提取物(ANE)可以抑制疾病的发生和各种病原体的生长GydF4y2Ba赤星病GydF4y2Ba那GydF4y2BaDidymella applanataGydF4y2Ba那GydF4y2BaFusarium oxysporumGydF4y2Ba那GydF4y2BaBotrytis cinereaGydF4y2Ba[GydF4y2Ba12GydF4y2Ba那GydF4y2Ba13GydF4y2Ba]，GydF4y2BaColletorichum炭疽病GydF4y2Ba[GydF4y2Ba14GydF4y2Ba]，GydF4y2BaPhytophthora CapsicaGydF4y2Ba[GydF4y2Ba15GydF4y2Ba] 和GydF4y2Baverticillium.GydF4y2Basp。GydF4y2Ba16GydF4y2Ba］．据报道，宏观和微量营养素以及普遍促进剂（类似于植物激素的化合物，如植物激素，如植物激素，如植物激素），其存在于大类提取物中的植物提取物中的植物激素，对植物具有有益作用细胞代谢，导致增强作物生长和产量[GydF4y2Ba17GydF4y2Ba那GydF4y2Ba18GydF4y2Ba］．生物活性的生长素样化合物和吲哚乙酸（IAA），也有报道在的碱性水解产物GydF4y2Ba答:结节性。GydF4y2Ba除了这些化合物，GydF4y2BaA. Nodosum.GydF4y2Ba提取物也含有独特的多糖，例如昆布多糖，岩藻依聚糖和藻酸[GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba19GydF4y2Ba］．壳聚糖(CHT)是一种天然的生物聚合物(甲壳素的衍生物)，它被证明可以激发植物对多种病原体的防御机制[GydF4y2Ba20.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba21GydF4y2Ba］．壳聚糖处理增加了致病相关蛋白(PR)、蛋白酶抑制剂、植物抗毒素的合成以及愈伤组织的形成和木质素的合成。海枣壳聚糖根注射(GydF4y2BaPhoenix DactyliferaGydF4y2Ba诱导多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(PO)活性，导致酚类化合物水平升高[GydF4y2Ba22GydF4y2Ba］．其他几项研究报告使用壳聚糖对植物病原体（如GydF4y2Baerysiphe.GydF4y2Basp。和GydF4y2BaBlumeria茎GydF4y2Baf . sp。GydF4y2BaHORDEI.GydF4y2Ba[GydF4y2Ba23GydF4y2Ba那GydF4y2Ba24GydF4y2Ba那GydF4y2Ba25GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

一些研究表明，ANE和CHT通过诱导PAL、PO和H的表达来触发植物的防御反应GydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba．叶面喷雾肛门的防御相关酶活性，包括过氧化物酶（PO），多酚氧化酶（PPO），苯丙氨酸氨裂解酶（PAL）和Charot中的胰蛋白酶[GydF4y2Ba12GydF4y2Ba[黄瓜[GydF4y2Ba13GydF4y2Ba］．ANE在辣椒植物上的应用导致过氧化物酶活性和植物素合成的多变增加[GydF4y2Ba15GydF4y2Ba］．将ANE加入到种植培养基中，导致辣椒中积累了高浓度的酚类物质[GydF4y2Ba16GydF4y2Ba］．壳聚糖的应用也得到了类似的结果。壳聚糖喷施可提高秋葵植株总酚含量，提高多酚氧化酶、过氧化物酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶[GydF4y2Ba26GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

早些时候通过引发全身性阻力，提前报告建议ANE和CHT保护植物免受病原体。ANE应用诱导全身性抗性，主要是通过茉莉酸依赖性途径[GydF4y2Ba27GydF4y2Ba］．相比之下，脱乙酰壳多糖的应用引起系统获得性抗性，它是一种水杨酸介导的途径[GydF4y2Ba28GydF4y2Ba］．该研究侧重于ANE和CHT联合应用对PM发育的影响，以及导致豌豆中PM抗性的可能机制。GydF4y2Ba

ANE和CHT可降低豌豆白粉病的严重程度GydF4y2Ba

单独或联合喷施ANE和CHT的豌豆苗(播后21天)对白粉病的抗性增强。所有治疗的疾病严重程度显著(GydF4y2BaP≤0.05GydF4y2Ba)低于对照(喷有消毒蒸馏水)。与对照组的90.5%相比，治疗组的发病率(PDI)分别为:ANE + CHT组为35%，ANE组为60%，CHT- 52.5%。GydF4y2Ba1GydF4y2Ba）.与对照相比，联用可使芽管发育到0.45个/孢子、附着孢子减少到0.2个/孢子、芽管长度减少到0.046 mm，从而抑制病原菌的建立。GydF4y2Ba2GydF4y2Ba和GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba）.此外，在萌发孢子附近的植物细胞也观察到褐变(图。GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba）.This indicated a hypersensitive response, triggered by the pathogen challenge, in CHT and ANE + CHT treatments.

ANE和CHT协同诱导植物防御反应GydF4y2Ba

ANE和CHT既当应用于单独或组合诱导的植物防御相关的酶如苯丙氨酸氨裂解酶（PAL）和过氧化物酶和以及总酚浓度的增加。的phenyl alanine ammonia lyase (PAL) activity increased gradually 24 h after treatment and was the highest at 72 h post treatment. Plants treated with ANE + CHT exhibited the highest PAL activity (1.369 nmol cinnamic acid/min/mg protein), followed by the ANE alone (1.14 nmol cinnamic acid/min/mg protein) while CHT alone (0.90 nmol cinnamic acid/min/mg protein) had a higher PAL activity as compared to the control, and all treatments were statistically significant atP≤0.05GydF4y2Ba（图。GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba一种）。过氧化物酶活性在24小时后逐渐增加，并且在0.70单元/ min / g鲜重（FW）下是48小时后ANE + CHT处理中最高的。在72小时后病原体攻击后，PO活性在组合治疗中降至0.01u / min / g fw。因此，ANE + CHT处理优于所有其他治疗。有趣的是，用ANE + CHT处理的植物中的PAL活性稳定，并没有随时间变化（图。GydF4y2Ba5.GydF4y2Bab）。最高的H.GydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba在治疗后，在ANE + CHT，48小时内观察到生产（75.73μg/ g fW），并且在72小时下，活性急剧下降。H.GydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2BaCHT (47.7 μg/g FW)和ANE (42.21 μg/g FW)处理植株的浓度相近。GydF4y2Ba5.GydF4y2BaC）。用组合处理处理的豌豆植物中的总酚醛植物的浓度分别为8.89,19.18和18.38μg/ g，分别为0.8.38μg/ g，显着高于（GydF4y2BaP≤0.05GydF4y2Ba)，与其他处理相比(图。GydF4y2Ba5.GydF4y2Bad）。值得注意的是，来自ANE + CHT治疗的植物中TPC的积累稳定，72小时没有显着下降。GydF4y2Ba

ANE和CHT增强了防御响应机制中涉及的转录物的积累GydF4y2Ba

用ANE + CHT处理的豌豆植株中，防御反应基因的转录丰度最高。GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba）.GydF4y2BaNPR1.GydF4y2Ba和GydF4y2BaPR1GydF4y2Ba与未处理对照相比，基因转录本分别增加了10.41倍和2.57倍。这表明sa介导的信号被激活。同样，联合治疗也增加了ja介导的信号基因的转录本，GydF4y2Ba熏鲑鱼GydF4y2Ba(11.09折)GydF4y2Ba细胞色素氧化酶GydF4y2Ba（2.96倍）和GydF4y2BaPDF1.2GydF4y2Ba(2.38倍)以及肉桂酸-4-羟化酶(GydF4y2BaC4HGydF4y2Ba)(3.72倍)基因。GydF4y2Ba

在the present study, the combined treatment of ANE + CHT outperformed other treatments (ANE or CHT alone) in suppressing powdery mildew through the induction of defense mechanisms in pea plant. Commercial extracts ofA. Nodosum.GydF4y2Ba据报道，在植物中减轻一些生物和非生物胁迫高效。ANE也促进植物的生长，而多糖和寡糖提取物中存在的是植物防御反应有效的激发子（Phyco对于-激发子）GydF4y2Ba29GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

ANE的抗真菌活性已经充分记录了各种植物病原体[GydF4y2Ba13GydF4y2Ba］．同样，壳聚糖的抗真菌活性也有报道[GydF4y2Ba10GydF4y2Ba］．叶面在植物如秋葵喷壳聚糖减少白粉病[GydF4y2Ba26GydF4y2Ba)大麦(GydF4y2Ba23GydF4y2Ba]和葡萄藤[GydF4y2Ba25GydF4y2Ba］．此外，壳聚糖还具有直接抑制多种植物病原菌孢子萌发的活性。几丁质寡糖抑制孢子萌发，并导致生长中的菌丝形成孔和细胞渗漏GydF4y2Ba镰刀GydF4y2Basp。GydF4y2Ba30.GydF4y2Ba］．菌丝生长和孢子萌发GydF4y2Ba刺盘孢属、炭疽GydF4y2Ba也被壳聚糖抑制。此外，处理导致菌丝的结构降解[GydF4y2Ba31GydF4y2Ba］．然而，ANE和CHT联合治疗PM感染的疗效尚未见报道。在目前的研究中，两种生物刺激剂的联合应用比单独治疗产生了更好的疾病抑制。联合处理降低了芽管/分生孢子数、附着孢子/分生孢子数和芽管长度。GydF4y2Ba

A. Nodosum.GydF4y2Ba提取治疗增加了病原相关蛋白I的转录物（GydF4y2BaPR-I.GydF4y2Ba），脂质转移蛋白（GydF4y2BaLTP.GydF4y2Ba)、苯丙氨酸解氨酶(GydF4y2Ba朋友GydF4y2Ba)，GydF4y2BaNPR-I，PR-5，WRKY30GydF4y2Ba,GydF4y2BaCYP71A12GydF4y2Ba[GydF4y2Ba12GydF4y2Ba那GydF4y2Ba13GydF4y2Ba］．以前的报告显示，ANE治疗诱导抗性GydF4y2Ba拟南芥GydF4y2Ba突变体，缺乏水杨酸（GydF4y2BaNahGGydF4y2Ba和GydF4y2BaICS1GydF4y2Ba），他们没有这样做，在GydF4y2Bajar1GydF4y2Ba突变体。这些结果表明，ANE激活了植物中ja依赖的防御机制[GydF4y2Ba27GydF4y2Ba］．壳聚糖的应用诱导了几丁质酶、壳聚糖酶等PR蛋白的表达，这些酶参与了病原体细胞壁的降解[GydF4y2Ba32GydF4y2Ba］．CHT应用在茉莉酸两者中诱导关键基因[GydF4y2Ba33GydF4y2Ba]和水杨酸[GydF4y2Ba34GydF4y2Ba信号传导途径。CHT在水稻植物中的应用诱导八藻岩途径的关键组分，如12-氧植物（OPDA）和茉莉酸[GydF4y2Ba35GydF4y2Ba］．其它研究报道了在植物中在处理CHT产量增加茉莉酸（JA），如番茄[GydF4y2Ba36GydF4y2Ba]， 白饭 [GydF4y2Ba35GydF4y2Ba]和油菜籽[GydF4y2Ba37GydF4y2Ba］．相比之下，少数研究报告水杨酸(SA)的产量增加[GydF4y2Ba28GydF4y2Ba那GydF4y2Ba38GydF4y2Ba］．JA和SA防御途径之间的相互作用是复杂的，很可能已经发展到微调抵御不断变化的病原体压力。已经提出了JA和SA机制之间的正面和负相互作用。然而，大多数相互作用似乎是自然界的拮抗作用，其中一个人抑制了另一个的表达。JA依赖性PR蛋白质，包括植物防御素1.2（GydF4y2BaPDF1.2GydF4y2Ba), thionin2.1 (GydF4y2BaTHI2.1GydF4y2Ba)、静脉状蛋白(GydF4y2BaHEL.GydF4y2Ba）和chitinaseb（GydF4y2Ba奇夫GydF4y2Ba)通常用于监视依赖于java的防御响应[GydF4y2Ba39GydF4y2Ba］．GydF4y2BaNPR1.GydF4y2Ba是植物防御反应的中心调控因子，连接系统获得性抗性(SAR)和诱导系统抗性(ISR) [GydF4y2Ba40GydF4y2Ba那GydF4y2Ba41GydF4y2Ba］．此外，该基因已被报道在SAR反应中对多种生物有效[GydF4y2Ba42GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

ANE和CHT的组合应用导致SA介导的表达更高GydF4y2BaNPR1，PR1，GydF4y2Ba还有那的JA介导GydF4y2Ba液态氧,COIGydF4y2Ba和GydF4y2BaPDF1.2GydF4y2Ba基因GydF4y2Ba．GydF4y2Ba这些观察结果表明SA和JA介导的信号导致PM感染导致的信号。在这项研究中，hGydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba产量显著（GydF4y2BaP≤0.05GydF4y2Ba）ANE + CHT治疗更高。成绩单的增加GydF4y2BaNADPH.GydF4y2Ba-oxidase可与ROS产生相关联[GydF4y2Ba43GydF4y2Ba］．萌发的Conidia周围的宿主细胞褐细胞感染的部位表明了用ANE + CHT处理的植物中过敏反应的可能性。进一步研究使用基因组学，代谢组科或策略方法将有助于对ANE和CHT组合的作用方式的表征。GydF4y2Ba

相比于单独的治疗ANE和CHT的组合应用表现出更高的抗真菌活性。该组件引发的生产厂房与国防有关的酶和代谢物。此外，联合治疗同时也诱发了SA和JA依赖植物防御基因，导致减少白粉病感染的成绩单。GydF4y2Ba

豌豆植株的制备及病原菌接种GydF4y2Ba

豌豆植物（栽培军刀，Veseys种子加拿大）在含Promix®（英超技术，QC，加拿大）罐中生长。P.lants were grown in greenhouse maintianed at 16:8 h light:dark cycle, at 21 ± 2 °C. Pathogen inoculum was collected from naturally infected pea plants in the field (Chef’s Garden, Dalhousie University, Truro, Canada). The pathogen was identified by morphological characterization.

治疗和接种病原体GydF4y2Ba

用ANE - 0.015%喷雾处理豌豆植株(Acadian Seaplants Limited, ANE的化学成分早前已被报道[GydF4y2Ba44GydF4y2Ba)和壳聚糖(CHT) - 100ppm (Sigma Aldrich®)，单独和组合。植物被喷洒到滴落。用无菌蒸馏水喷洒对照植物。对处理过的植株进行接种GydF4y2Ba白粉菌属pisiGydF4y2Ba在第48小时后描述previoulsy的协议[GydF4y2Ba45GydF4y2Ba］．实验以每处理10个重复，每个重复12种植物重复三次。GydF4y2Ba

ANE和CHT在抑制PM疾病发展中的作用GydF4y2Ba

在接种后24小时和48小时收集叶样品，以评估分析萌发治疗的效率。叶片用乙醇：乙酸溶液（3：1）是脱氯化的。叶子用红叶蛋白棉蓝色染色（德国默克）。观察到细菌/分枝叶，细菌管长度，孕产量/分枝瘤的数量。每次治疗和平均值计数50个孢子。观察疾病严重程度15天，接种后，遵循0-4规模[GydF4y2Ba46GydF4y2Ba]，where 0 = no visible sign of infection, 1 = 25% leaf area infected, 2 = 50% leaf area infected, 3 = 75% leaf area infected and 4 = 100% leaf are infected with freely sporulating colonies (Fig.3.GydF4y2Bab）。在下面给出的下式计算疾病指数（PDI）百分比。GydF4y2Ba

烷和CHT在诱导植物防御反应中的作用GydF4y2Ba

从接种后24小时，48小时和72小时从PM接种植物收集叶样品。每次治疗每次重复有12种植物，重复实验两次。GydF4y2Ba

苯丙氨酸氨水酶（PAL）GydF4y2Ba

叶片样品(每处理0.5 g)研磨在4ml硼酸缓冲液中(pH 8.7;4°C)， 13,000 rpm, 4°C离心15分钟。上清液作为反应混合物中的酶源。酶提取物0.2 mL，蒸馏水1.3 mL，苯丙氨酸(0.1 M) 1.0 mL, 32℃孵育30-60 min，加入1 M三氯乙酸0.5 mL终止反应。在290 nm处反式肉桂酸形成后测定PAL活性，如所述[GydF4y2Ba47GydF4y2Ba，以nmol反式肉桂酸每分钟每毫克新鲜重量(FW)表示。GydF4y2Ba

过氧化物酶(PO)GydF4y2Ba

以下公开的方案进行过氧化物酶（PO）测定[GydF4y2Ba48GydF4y2Ba］．在4ml 0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.0）中萃取叶组织（1g）。上清液用作酶源，反应混合物由;0.1ml酶提取物，2.8ml 0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.0），0.05mL 0.018m Guaiacol和100μl1％hGydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba．Absorbance of the reaction mixture were recorded using a spectrophotometer (Cytation 5 - BioTek, USA) (λ = 420 nm) every 30 s for 3 minutes (6 absorbance values per reaction mixture). Enzyme activity was expressed as the change in OD per minute per gram of FW.

过氧化氢（HGydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba）GydF4y2Ba

用于量化hGydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba那0.1 g leaf sample was ground in 2.0 mL of 0.1% (w/v) trichloroacetic acid in an ice bath. The extract was centrifuged at 12,000 g for 10 min. The reaction mixture contained 0.5 mL of the supernatant, 10 mM potassium phosphate buffer (pH 7.0) and 1 mL of 1 M potassium iodide. The mixture was incubated at room temperature for 5 min and absorbance measured using a spectrophotometer (Cytation 5 - BioTek, USA) (λ = 390 nm) [49GydF4y2Ba］．h的数量GydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba通过将结果与的H已知浓度制成的标准曲线进行比较来确定GydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2Ba用nmol H表示GydF4y2Ba_2GydF4y2BaO.GydF4y2Ba_2GydF4y2BaGGydF4y2Ba^{−1GydF4y2Ba}鲜重（FW）。GydF4y2Ba

总酚含量(TPC)GydF4y2Ba

总酚含量(TPC)按照前面描述的方法进行量化[GydF4y2Ba50.GydF4y2Ba］．在50％甲醇中萃取叶组织（1g）。将上清液蒸发，溶于蒸馏水（1mL）中，并用分光光度计分析，后者 - CioCalteau方法[GydF4y2Ba51.GydF4y2Ba］．用没食子酸标准曲线计算没食子酸当量。GydF4y2Ba

ANE和CHT对防御相关基因的影响GydF4y2Ba

的相对表达GydF4y2BaNPR1.GydF4y2Ba那GydF4y2BaLOX1，PDF1.2，NADPH氧化酶，C4H，GydF4y2Ba和GydF4y2BaPR1GydF4y2Ba采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测。使用RNeasy植物迷你试剂盒(QIAGEN)，按照制造商的协议从200mg粉末叶片组织中提取总RNA。从12个复制植株中分别收集3个叶片样本，并汇集在一起获得总RNA。总RNA的数量和质量通过NanoDrop™2000分光光度计(ThermoScientific)和琼脂糖凝胶电泳进行评估。根据制造商的协议，使用RevertAid RT逆转录试剂盒(ThermoScientific)合成cDNA。qPCR使用steone™real-time PCR System (Applied Biosystem, USA)，使用SYBR®Green Supermix Kit (Bio-Rad, USA)进行。采用Primer3软件(Version 4.1.0)设计基因特异性引物[GydF4y2Ba52.GydF4y2Ba]在表中列出GydF4y2Ba1GydF4y2Ba．qRT-PCR检测是在[GydF4y2Ba53.GydF4y2Ba］．2GydF4y2Ba^{-ΔΔctGydF4y2Ba}方法比较[GydF4y2Ba54.GydF4y2Ba］．实验重复三次，生物学重复三次，技术重复三次。GydF4y2Ba

统计分析GydF4y2Ba

统计分析采用SPSS（版本24）完成。实验采用完全随机设计，重复三次。数据表示为平均三个独立重复±标准差。处理装置通过邓肯的多范围检验分离（GydF4y2BaP.GydF4y2Ba≤0.05)。GydF4y2Ba

所有基因序列均可通过NCBI数据库查询。GydF4y2Ba

一:GydF4y2Ba

褐藻GydF4y2Ba提炼GydF4y2Ba

朋友：GydF4y2Ba

苯丙氨酸氨裂解酶GydF4y2Ba

PDI:GydF4y2Ba

疾病百分比严重程度GydF4y2Ba

博:GydF4y2Ba

过氧化物酶GydF4y2Ba

PPO:GydF4y2Ba

聚酚氧化酶GydF4y2Ba

QRT-PCR：GydF4y2Ba

定量实时聚合酶链反应GydF4y2Ba

RT:GydF4y2Ba

逆转录酶GydF4y2Ba

SD：GydF4y2Ba

标准偏差GydF4y2Ba

TPC:GydF4y2Ba

总酚含量GydF4y2Ba

我们感谢Tudor Borza博士编辑稿件。GydF4y2Ba

BP实验室由加拿大Mitacs (GydF4y2Bawww.mitacs.caGydF4y2Ba）和Acadian Seagplants Limited（GydF4y2Bawww.acadian.caGydF4y2Ba）.资助伙伴在实验的设计、数据收集和分析以及手稿的撰写中没有发挥任何作用。GydF4y2Ba

从属关系GydF4y2Ba

1. 植物食品与环境科学，达尔豪斯大学，加拿大新斯科舍系GydF4y2Ba

   Jai Singh Patel, Vinodkumar Selvaraj, Lokanadha Rao Gunupuru, Pramod Kumar Rathor和Balakrishnan PrithivirajGydF4y2Ba

贡献GydF4y2Ba

所有作者都读过并批准了稿件。JSP和LRG进行的实验，JSP和BP写的稿子，PKR和VS在实验过程中的帮助下，BP和VS编辑稿件的语言。所有作者阅读并认可的终稿。GydF4y2Ba

相应的作者GydF4y2Ba

对应于GydF4y2Ba维文PrithivirajGydF4y2Ba．GydF4y2Ba

伦理批准和同意参与GydF4y2Ba

不适用。GydF4y2Ba

同意出版物GydF4y2Ba

不适用。GydF4y2Ba

利益争夺GydF4y2Ba

提交人声明他们没有竞争利益。GydF4y2Ba

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